ZAMBURUG’LARDAN AMILAZA PREPARATINI AJIRATIB OLISH. - Amilaza grekcha “kraxmal”- fermenti degan ma’noni anglatadi, kraxmalning oligosaxaridgacha parchalanishini ta’minlab, hazm qilishda qatnashadi.
- Amilazaning 3 xil turi mavjud:
- 3-gidrolazalar sinfiga mansub
- 3.2-glikozilazalar
- 3.2.1-glikozid gidrolazalar
- K.F 3.2.1.1-Alfa-amilaza (1,4 a-D-glyukon glyukongidrolazalar)
- K.F 3.2.1.2-Beta-amilaza (1,4 a-D-glyukon maltongidrolazalar)
- K.F 3.2.1.3-Gamma-amilaza (glyukon 1,4 a-D-glyukozodaza)
Kerakli asboblar, reaktivlar. - Termostat,
- suv hammomi,
- shisha voronka,
- 50 ml ga mo’ljallangan tumshug’i bor silindr,
- farfor plastinka,
- 100 ml Erleymeyer konik kolba,
- kimyoviy shisha probirka,
- zamburug’ kukun,
- kraxmal (1%),
- yod (0,3%) kaliy yodidda (3%).
Zamburug’ mitseliylarini kultivatsiya qilish. - Zamburug’ mitseliylari bir nechta komponentli sintetika ozuqa muhitda rivojlanadi. Tarkibi (Chapek muhiti) quyidagi:
- saxaroza – 3 g,
- NaNO3-0,2-0,2 g,
- KH2 PO2-0,1g, MgSO4-0,05g,
- KCL-0,05g,
- FeSO4( yoki Fe2 (SO4)3)-0,001g,
- suv bilan 100 ml gacha olib boriladi (pH-7).
Zamburug’ mitseliyar massasini olish - Zamburug’ mitseliyali massasini olish uchun pix boylagan zamburug’dan (Asperguillus niger) bir parchasini Chapek muhitiga joylashtiriladi zamburug’ mitseliyinning toza kulturasidan foydalaniladi. 5-6 kundan so’ng muhitning ustida qo’ziqorinning kuchli qavati rivojlanadi va bundan amilaza ajratib olinadi.
- Zamburug’ mitseliylari massasini muhitdan filtrlab olinadi va shishaning ustiga joylashtiriladi va 37 0C haroratda quritiladi.
- Quritilgan massani farfor havonchada kvars qumning 3 marotaba ko’proq miqdorda yangilanadi. Olingan yupqa bir miyordagi kukun amilaza olish uchun mo’ljallangan.
Zamburug’ mitseliylaridan amilazaning ta’sirini aniqlash - Zamburug’ mitseliylaridan olingan preparatning 2 g ni 37 0C isitilgan suvning 50 ml bilan 5 daqiqa aralashtiriladi va shu haroratda 2 soat to’yintiriladi.
- Yaxshilab silkitilgandan so’ng qattiq qoldiq filtrlanadi. Filtratda qo’ziqorin amilazalar kompleksi bor.
- Probrkaga olingan filtaratdan 5 ml qo’yiladi va 10 ml 1% kraxmal qo’shiladi va tez silkitiladi.
- Tez probirkadagi suyuqlikning bir tomchisini (shisha tayoqcha yordamida) fafor plastinka ustida kaliy yodid eritmasidan tayyorlangan yod eritmasini 1-2 tomchisi bilan aralashtiriladi.
- Proba (namuna) - to’q ko’k rang hosil qiladi.
- Probirkani 400 C gacha qizdirilgan suv hammomiga joylashtiriladi va har 2 daqiqadan so’ng probirkada proba (namuna) olinib tekshirilib turiladi.
- Kraxmal parchalanishi bilan yodli probalar har xil rangda bo’ladi: ko’k siyoh rang, qizil va nihoyasida sariq rang, chunki har xil murakkab darajadagi dekstirinlar hosil bo’ladi.
DEKSTRINLAR E’TIBORINGIZ UCHUN RAXMAT!
Do'stlaringiz bilan baham: |
