1 Источники получения ферментных препаратов. Классификация и номенклатура ферментов и ферментных препаратов. Характеристика активности ферментных препаратов

Подготовка посевного материала для глубинного культивирования. Вид посевного материала зависит от продуцента: для грибов и актиномицетов - это мицелиальная масса, а для бактерий – молодая спороносящая культура.
Этапы получения посевной культуры:

1. 
   Обновление исходной культуры на агаризованной среде;
   
2. 
   Выращивание культуры на жидкой среде в колбах на качалке;
   
3. 
   Культивирование продуцента в малом и большом инокуляторах.
   

Посевная доза при засеве глубинной культурой сравнительно большая - от 1 до 15%.
Исходный продуцент из пробирки пересевают на матрацы с большим количеством агаризированной среды. С матрацев культуру смывают стерильной водой и в виде суспензии используют для засева колб. Колбы закрепляют на качалке, и переносят в малый инокулятор со стерильной охлажденной средой. Подготовку, стерилизацию и охлаждение питательной среды производят в малом инокуляторе. Пеногаситель стерилизуют и охлаждают в специальной емкости и подают в малый инокулятор.
Для большого инокулятора среду готовят, как правило, в специальных аппаратах, затем ее стерилизуют и подают в стерильный охлажденный до 60-70°С большой инокулятор, выравнивают температуру среды до оптимальной для выращиваемого продукта. После этой операции готовую культуру из малого инокулятора передавливают стерильным воздухом в большой инокулятор на свежую питательную среду.

3 Питательные среды для культивирования микроорганизмов-продуцентов ферментов: принципы составления и приготовления Питательные среды для культивирования микроорганизмов. Основным требованием, предъявляемым к составу питательной среды, является её полноценность для роста продуцента и обеспечения синтеза целевого продукта. В состав питательной среды должны входить минеральные вещества (магний, кальций, фосфор, сера, железо, калий и др). Питательные вещества расходуются м/ми не только на построение растительной клетки, но и на обеспечение энергией основных жизненных процессов. Так как подавляющее большинство продуцентов ферментов является аэробами, почти все углеводы потребляются ими путем окисления и основными продуктами метаболизма являются диоксид углерода и вода. Источником азота для микроорганизмов - продуцентов ферментов могут быть сложные органические вещества, их гидролизаты и минеральные соли, кукурузный экстракт, соевая и пшеничная мука, гидролизат казеина и т. д. Минеральный азот в среде обычно представлен аммонийными солями и нитратами. Для микроорганизмов необходимы фосфор и сера. Часто в среды вносят мел, который связывает образующиеся кислоты и его роль сводится к регулированию рН среды. Также он служит источником микроэлементов. Среды в зависимости от состава делятся на синтетические и комплексные. Синтетическими считают среды, состоящие из вполне определенных по количественному составу индивидуальных веществ. Источниками углерода в таких средах могут быть углеводы, спирты, органические кислоты; источниками азота - соли, содержащие азот, аминокислоты, пептиды определенного состава, мочевина и т. д. В комплексные среды обычно входят различные естественные продукты, богатые органическими соединениями, и отходы ряда производств. Их компонентами могут быть отруби, мука различных злаков, меласса, гидрол (отход при производстве глюкозы из крахмала), кукурузный экстракт, выжимки плодов и овощей, различные жмыхи, замочные воды, барда спиртовых заводов, картофельная мезга и прочие отходы картофеле- и кукурузокрахмального производства, а также других пищевых производств.