Принципы составления питательных сред для культивирования микроорганизмов. При поверхностном культивировании основой большинства сред являются пшеничные отруби. Среда м.б. обогащена некоторыми рыхлителями или обогатителями БАВ. Содержание крахмала в отрубях д.б. не менее 16 – 20 %. Введение в состав среды свекловичного жома приводит к увеличению количества синтезируемого фермента в 5 – 6 раз, однако увеличение концентрации жома до 70 % приводит к снижению биосинтеза. Так же в качестве добавок можно использовать биошрот, представляющий собой нерастворимый остаток культуры после экстракции фермента.
Углерод определяет основные метаболические пути м/о. Используется как скелетный материал при построении клеточного вещества, как источник энергии. Выбор источника углерода зависит от физиологии продуцентов и вида образуемого им фермента. К органическим источникам азота относятся живые белки (желатин, казеин), растительные белки (кукуруза, солод), а так же белки биомассы м/о, гидролизаты белков.
Р в среду вносят в виде солей H3PO4. Иногда в виде органических соединений (фитин). Р вводят в виде отваров растительной муки. Он стимулирует биосинтез протеаз, амилаз, пектиназ. М/о требуют введения в среду витаминов: В1, В2, В6, В5, В8, Н, В12, тиамина
В среде всегда присутствует ряд металлов, тормозящих синтез ферментов. При этом в зависимости от концентрации одни и те же Ме могут быть как стимуляторами, так и ингибиторами синтеза ферментов. Приготовление питательных сред. Сухие компоненты для приготовления питательных сред хранят в основном производственном здании или специальном складском помещении. Питательную среду для поверхностного культивирования готовят в стерилизаторе или специальной емкости с перемешивающими устройствами, куда дозируют отдельные компоненты и смешивают их с водой или водным раствором обогатителей (разваренная масса, соли, кислоты, кукурузный экстракт). При глубинном способе культивирования приготовление среды осуществляется в специальной емкости. Если производство небольшое, то приготовление среды и ее стерилизацию можно осуществлять в одном помещении. Но с позиции ведения рациональной технологии, особенно на крупных предприятиях, цех приготовления питательной среды изолируют от других производственных помещений, чтобы предотвратить попадание нестерильного, загрязненного микроорганизмами сырья в основное производство.
Методы приготовления питательных сред различны и зависят от состава входящих в среду компонентов. Для одних компонентов требуется предварительная обработка: измельчение, дробление, отваривание, экстрагирование и т. д. Эти подготовительные операции проводят в специальных емкостях и в специальных аппаратах. Подработанные компоненты среды (измельченный жмых, глютен, картофель, растворенный в горячей воде, и частично разбавленный кукурузный экстракт) подают при постоянном перемешивании через дозирующие устройства в емкость для приготовления среды. В зависимости от свойств компонентов среду можно готовить путем их растворения или суспендирования в холодной или подогретой воде.
В последнее время появилась тенденция составления питательных сред на основе различных гидролизатов (гидролизаты растительных отходов, микробных масс, крахмала и т. д.). В этом случае необходимы специальные емкости для проведения процессов гидролиза
|
