Академии наук т. П. Побежимова, А. В. Колесниченко, О. И. Грабельных

particles // Isolation of membranes and organelles from plant cells 
/ Eds. Hall T.L., Moore A.L. London: Acad. Press. - 1983. - 
P.153-184. 
Tolbert N.E. Isolation of sub-cellular organelles of metabolism on 
isopicnic sucrose gradients // Methods Enzymol. 1974. V.31. 
P.734-746. 
Wharton D.C., Tzagoloff A. Cytochrome oxidase from beef heart 
mitochondria // Methods Enzymol. – 1967. – V.10. – P. 245-250. 
1.2
МЕТОД ПОЛЯРОГРАФИЧЕСКОГО АНАЛИЗА 
ЭНЕРГЕТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ 
МИТОХОНДРИЙ 
 
Принцип полярографического метода. Определение 
окислительной и фосфорилирующей активности митохондрий 
проводится с использованием полярографического метода 
измерения дыхания. Полярографический метод характеризуется 
быстротой, 
большой 
чувствительностью, 
автоматической 
регистрацией полученных результатов. Метод основан на реакции 
восстановления на катоде при наложении разности потенциалов 0,6-
0,8 В. Возникающий при этом ток служит мерилом концентрации 
кислорода в среде и регистрируется при помощи полярографа (Рис. 
9) (Руководство…, 1973; Зеленский, 1986).
Для полярографических работ применяется схема, состоящая 
из источника питания, ячейки и сопротивления, с которого 
снимается напряжение на самопишущий потенциометр (Рис. 7). 

---

29 
Чтобы предотвратить инактивацию, вызываемую отложением на 
катоде белков и других соединений, Кларком предложено 
покрывать катод полимерной пленкой, проницаемой только для 
газов. В настоящее время широко используется следующая 
конструкция полярографической ячейки (Рис. 8). В ячейке 
используется неподвижный платиновый электрод, отделенный от 
исследуемого раствора полимерной пленкой, проницаемой для 
кислорода (Руководство…, 1973; Зеленский, 1986).
Термостатирование осуществляется потоком жидкости 
внутри ячейки, раствор перемешивается магнитной мешалкой, 
расположенной над пленкой, покрывающей электроды (Рис. 7). 
Рабочим катодом, на котором восстанавливается кислород является 
платина, а электродом сравнения – серебро (Рис. 8). Электроды 
совмещены в одном блоке из тефлона, который выполняет роль 
крышки и входит в ячейку как поршень. Объем ячейки 1,4 мл. 
Ячейки из плексигласа размещаются в гнездах термостатируемой 
камеры, находящейся на электромагнитной мешалке. Внутри ячеек 
располагаются магнитики, при помощи которых осуществляется 
перемешивание. Митохондрии вносятся в ячейку быстро через паз 
тефлонового блока.