Академии наук т. П. Побежимова, А. В. Колесниченко, О. И. Грабельных

Рис. 9. Внешний вид полярографа ОН 105 

---

32 
Рис. 10. Полярографическая регистрация потребления 
кислорода 
митохондриями 
в 
разных 
метаболических состояниях 
Применение ингибиторного анализа для изучения 
отдельных 
звеньев 
дыхательной 
цепи. 
Специфические 
ингибиторы являются важным инструментом при изучении 
последовательности и механизмов реакций фосфорилирования в 
дыхательной цепи. Согласно Рэкеру (1979), существует три класса 
соединений, препятствующих окислительному фосфорилированию: 
1) ингибиторы окислительной цепи (цианид, антимицин); 2) 
разобщители, препятствующие запасу энергии и стимулирующие 
рассеивание её в виде тепла (2,4-динитрофенол, карбонилцианид-m-
хлорфенилгидразон); 3) ингибиторы переноса энергии, которые 
препятствуют превращению энергии окисления в АТФ, ингибируя 
перенос энергии (олигомицин, рутамицин). Ингибиторы комплекса 
I – ротенон, пиерицидин, амитал, реин (субстрат окисления – 10 мМ 
малат + 10 мМ глутамат). Ингибиторы комплекса II – 
теноилтрифторацетон (ТТФА), малонат, оксалоацетат (субстрат 

---

33 
окисления* – 8 мМ сукцинат + 5 мМ глутамат). Ингибитор 
комплекса III – антимицин А (20 мкМ) (субстрат окисления* – 1 
мМ НАДН**). Ингибиторы комплекса IV – цианид (0.4 мМ), азид, 
оксид углерода (II) (субстрат окисления* – 0.2 мМ ТМФД + 2 мМ 
аскорбат). Ингибитор АТФ-азы – олигомицин (2.5 мкг на 1 мг 
митохондриального 
белка). 
Ингибиторы 
альтернативной 
оксидазы – бензгидроксамовая кислота (БГК) (1 мМ), припилгаллат 
(0.2 мМ), дисульфирам. 
* - при использовании этих субстратов в ячейку 
дополнительно вносят ротенон.
** - среда инкубации при окислении НАДН не содержит 
ЭДТА, но включает ионы Са
2+
(конечная концентрация CaCl
2
составляет 0.06 мМ).