Фармамакологик биокимё


Жихозлар. СФ, центрифуга, секундомер, центрифугали пробиркалар, ылчов колбалари, щар-щил хажмдаги пипеткалар. Реактивлар


Download 0.96 Mb.
Pdf ko'rish
bet54/68
Sana05.10.2023
Hajmi0.96 Mb.
#1692553
1   ...   50   51   52   53   54   55   56   57   ...   68
Bog'liq
Kitob 9101 uzsmart.uz

Жихозлар. СФ, центрифуга, секундомер, центрифугали пробиркалар, ылчов
колбалари, щар-щил хажмдаги пипеткалар.
Реактивлар.
1.
0,15м фосфатли буфер, рН-7,8. Уни тайёрлаш учун 8,96г Na
2
HPO
4
ва 0,5г
КН
2
РО
4
ларни 1л дистилланган сувда эритилади.
2.
Трис-ЭДТА буфери, рН-8,0. 100мл бидистилланган сувда 37,2 ЭДТА ва
24,3 мг трис эритилади. РН и бир неча томчи НСl =ышилиб, ани=ланади.
3.
0,005 трис- НСl буфер, рН-7,4. 302,8мг трис 500мл бидистилланган сувда
эрититлиб, рН-7,4 га етказиш учун 1н НСl эритмасидан =ышилади.
4.
Реагент II 6,2мг 
ЭДТА, 50г 
тетразол 
нитро 
кыки, 9,2мг
феназинметасульфатни 100мл фосфат буферида (рН-7,8) эритилади.
5.
Реагент II. 76,3мг НАД
.
Н 100мл фосфат буферида (рН-8,0) эритилади.
Иккала реагент (I âà II) музлатгичда са=ланади.
6.
0,9% натрий хлор эритмаси.
7.
3,8% лимон кислотасининг натрийли тузи
8.
хлороформ
9.
этил спирти
10.
ацетон


11.
=уру= муз
Текшириш материали. 3,8% лимон кислотаси натрийли тузи эритмасида
стабиллашган =он (1:10) ни 3000 айланиш тезлигида 15минут
центрифугаланади. Плазмани лейкоцитли =атлами билан олиб ташлаб,
эритроцитлар =атламига хажми икки баробар катта келадиган 0,9% натрий
хлор эритмаси =ышилиб, яхшилаб аралаштирилади, щосил былган
суспензияни ю=оридагидек центрифугаланади . Чыкма устки сую=лиги олиб
ташланиб, ювилган эритроцитларда СОД ани=ланади . Бунинг учун 1мл
эритроцитларга 9мл 5мМ трис-НСl буфери (рН-7,4) =ышиб, гемолизат
тайёрланади ва гемоглобин чыктирилади, чунки гемоглобин СОДни
ани=лашга халал беради. Сынгра 8мл эритроцитлар гемолизига этил спирти
(2мл) ва хлороформ (1,2мл) аралашмасидан аралаштирилиб турилган щолда
томчилаб =ышилади. Ушбу шароитда пробирка муз былаги са=лаган
ацетонли хаммомда (-30
0
С) турган былиши керак. Сынгра гемоглобин ва
хлороформни 
ажратиш 
учун 15минут 
давомида 5000 тезликда
центрифугаланади, олинган тини=, СОД са=
лаган супернатант анализ
=илинади.

Download 0.96 Mb.

Do'stlaringiz bilan baham:
1   ...   50   51   52   53   54   55   56   57   ...   68




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling