Darsning maqsadi: Oqsillarni gel-elektroforez usulida bir-biridan ajratishni o’rganish. Nazariy qism

 
 
18-rasm. Gel elektrofarezdan foydalanish. 
Kerakli asbob: elektroforez asbobi, mikropipetka, shprits, shisha naycha uchun shtativ, 
fotopolimerlash uchun lampa, elektr toki manbai, biriktiruvchi simlar , tris, akrilamid, 
TEMED, HCI, BIS
Reaktivlar: riboflavin, saxaroza, ammoniy persulfat, glitsin yoki (alanin), bromfenol 
qumi (metilen yashili), toza sirka qaxrabosi, (KOH). 

---

Eritma tayyorlash. Gel tayoyrlash uchun asosiy eritmalar.
Nordon oqsillar uchun. A) ishqoriy eritma(pH=8.9):
1. 48,0 ml I N HCI; 2. 
36,6 g tris;
3. 
0,23 ml TEMED 100ml gacha distillangan suv 
bilan keltiriladi.
4. 
48.0 ml I N HCI; 5. 5,98 g tris;
6. 
0,46 ml TEMED 100 ml gacha distillangan suv solinadi.
7. 
28.0 g akrilamid; 8.0,75 g BIS; 100 ml gacha distillangan suv solinadi.
9. 10 g akrilamid; 10.2,6 g BIS; 100 ml gacha distillangan suv solinadi.
11. 
400 mg riboflavin 100 ml gacha distillangan suv solinadi.
12. 
40 g saxaroza; 100 ml gacha distillangan suv solinadi.
13. 
0,14 g ammoniy persulfat; 100 ml gacha distillangan suv solinadi. 14. 6.0 g tris; 
15.28,8g glitsin 1000 ml gacha distillangan suv solinadi. Ishlatishdan avval 10 marta 
suyultirilishi lozim!
Indikator — bo’yovchi eritma; 0.001 g bromfenol ko’ki; 100 ml gacha distillangan suv 
solinadi.
Fiksirlovchi — bo’yovchi eritma; 1 g maid qorasi 10 V; 100 ml gacha 7%sirka qahrabosi 
solinadi.
Ajratuvchi — quyultiruvchi eritma; 1000 ml 7% sirka qahrobosi
Ishqoriy oqsillar uchun A nordon eritma(pH=4.3); 5,8 ml 1N KOH; 17,2 ml toza sirka 
qahrobosi; 4.0 ml TEMED; 100 ml gacha distillangan suv solinadi.
B) 
nordon eritma(pH=7,8): 48.0 ml 1N KON; 2,87 ml toza sirka qahrobosi; 0,48 ml 
TEMED; 100 ml gacha distillangan suv solinadi.
C) 
nordon eritma: 60 g akrilamid; 0,4 g BIS; 100 ml gacha distillangan suv solinadi.
E) 
nordon eritma: 4 mg riboflavin; 100 ml gacha distillangan suv solinadi.
F) 
nordon eritma 40 g saxaroza; 100 ml gacha distillangan suv solinadi.
K) nordon eritma: 0,28 g ammoniy persulfat; 100ml gacha distillangan suv solinadi. 
Elektrod buferi eritmasi(pH=4,5;) 31,2 gr –alanin; 8,0 ml toza sirka; 1000 mlgacha 
distillangan suv solinadi.
Ishlatishdan avval 10 marta suyultirilishi lozim!
Indikator — bo’yovchilari: 0,1g metilen yashili;100 ml gacha distillangan suv solinadi.
Ajratuvchi- quyultiruvchi eritma va fiksirlovchi — bo’yovchi eritmalar ishqoriy oqsillar 
uchun berilganidek qilib tayyorlanadi. «K» eritmadan tashqari barcha eritmalarni 
muzlatkichda saqlash mumkin. «K» eritma bevosita ishlatishdan oldin tayyorlanadi.