Darsning maqsadi: Oqsillarni gel-elektroforez usulida bir-biridan ajratishni o’rganish. Nazariy qism
Download 51.57 Kb. Pdf ko'rish
|
7-laboratoriya.Molekulyar
- Bu sahifa navigatsiya:
- Reaktivlar
18-rasm. Gel elektrofarezdan foydalanish. Kerakli asbob: elektroforez asbobi, mikropipetka, shprits, shisha naycha uchun shtativ, fotopolimerlash uchun lampa, elektr toki manbai, biriktiruvchi simlar , tris, akrilamid, TEMED, HCI, BIS Reaktivlar: riboflavin, saxaroza, ammoniy persulfat, glitsin yoki (alanin), bromfenol qumi (metilen yashili), toza sirka qaxrabosi, (KOH). Eritma tayyorlash. Gel tayoyrlash uchun asosiy eritmalar. Nordon oqsillar uchun. A) ishqoriy eritma(pH=8.9): 1. 48,0 ml I N HCI; 2. 36,6 g tris; 3. 0,23 ml TEMED 100ml gacha distillangan suv bilan keltiriladi. 4. 48.0 ml I N HCI; 5. 5,98 g tris; 6. 0,46 ml TEMED 100 ml gacha distillangan suv solinadi. 7. 28.0 g akrilamid; 8.0,75 g BIS; 100 ml gacha distillangan suv solinadi. 9. 10 g akrilamid; 10.2,6 g BIS; 100 ml gacha distillangan suv solinadi. 11. 400 mg riboflavin 100 ml gacha distillangan suv solinadi. 12. 40 g saxaroza; 100 ml gacha distillangan suv solinadi. 13. 0,14 g ammoniy persulfat; 100 ml gacha distillangan suv solinadi. 14. 6.0 g tris; 15.28,8g glitsin 1000 ml gacha distillangan suv solinadi. Ishlatishdan avval 10 marta suyultirilishi lozim! Indikator — bo’yovchi eritma; 0.001 g bromfenol ko’ki; 100 ml gacha distillangan suv solinadi. Fiksirlovchi — bo’yovchi eritma; 1 g maid qorasi 10 V; 100 ml gacha 7%sirka qahrabosi solinadi. Ajratuvchi — quyultiruvchi eritma; 1000 ml 7% sirka qahrobosi Ishqoriy oqsillar uchun A nordon eritma(pH=4.3); 5,8 ml 1N KOH; 17,2 ml toza sirka qahrobosi; 4.0 ml TEMED; 100 ml gacha distillangan suv solinadi. B) nordon eritma(pH=7,8): 48.0 ml 1N KON; 2,87 ml toza sirka qahrobosi; 0,48 ml TEMED; 100 ml gacha distillangan suv solinadi. C) nordon eritma: 60 g akrilamid; 0,4 g BIS; 100 ml gacha distillangan suv solinadi. E) nordon eritma: 4 mg riboflavin; 100 ml gacha distillangan suv solinadi. F) nordon eritma 40 g saxaroza; 100 ml gacha distillangan suv solinadi. K) nordon eritma: 0,28 g ammoniy persulfat; 100ml gacha distillangan suv solinadi. Elektrod buferi eritmasi(pH=4,5;) 31,2 gr –alanin; 8,0 ml toza sirka; 1000 mlgacha distillangan suv solinadi. Ishlatishdan avval 10 marta suyultirilishi lozim! Indikator — bo’yovchilari: 0,1g metilen yashili;100 ml gacha distillangan suv solinadi. Ajratuvchi- quyultiruvchi eritma va fiksirlovchi — bo’yovchi eritmalar ishqoriy oqsillar uchun berilganidek qilib tayyorlanadi. «K» eritmadan tashqari barcha eritmalarni muzlatkichda saqlash mumkin. «K» eritma bevosita ishlatishdan oldin tayyorlanadi. Download 51.57 Kb. Do'stlaringiz bilan baham: |
Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling
ma'muriyatiga murojaat qiling