Darsning maqsadi: Oqsillarni gel-elektroforez usulida bir-biridan ajratishni o’rganish. Nazariy qism
Download 51.57 Kb. Pdf ko'rish
|
7-laboratoriya.Molekulyar
- Bu sahifa navigatsiya:
- Zonali elektroforezning turlari. Qog’ozdagi elektroforez.
- Kraxmal gelidagi elektroforez.
|
7-LABORATORIYA MASHG’ULOTI
Oqsillarning gel elektroforezi 5. Zonali elektroforezda oqsillarni fraksiyalarga ajralishi tez boradi (ba’zi uslub bo’yash bilan birgalikda 1 —2 soatda bo’ladi). 6 . Zonali elektroforez asbobi sodda tuzilgan va erkin elektroforez asbobiga nisbatan arzonga tushadi. 7. Tashuvchi muhitning o’zida ajratilgan oqsil fraksiyalariga substrat ta’sir ettirib fermentlar aktivligini aniqlash mumkin. Shu bilan birga elektroforezning bir qator kamchiliklari ham mavjud. 1. Oqsillarning siljish tezligini to’g’ridan — to’g’ri aniqlab bo’lmaydi. 2. Aniqlanayotgan oqsil va tashuvchi muhit o’rtasida salbiy bog’lanish vujudga kelishi mumkin. Bunda oqsil tashuvchiga adsorbsiyalanib qolishi kuzatiladi. Qog’ozdagi elektroforezda adsorbsiyalanish kuchliroq bo’lib PAT da bu hodisa deyarli kuzatilmaydi. Zonali elektroforezning turlari. Qog’ozdagi elektroforez. Qog’ozdagi elektroforez keng tarqalgan usul bo’lib u maxsus filtr qog’ozda olib boriladi. Bu qog’oz yuqori gigroskopik bo’lishi, suvni shimishi natijasida uning og’irligi quruqligidagi og’irligiga nisbatan 180 — 200 marotaba oshishi shart. Elektroforez o’tkaziladigan asbobning turiga ko’ra elektroforez 4 soatdan 16 soatgacha davom etadi. Elektroforez qog’oz bo’yaladi va oqsilning ajralgan fraksiyalari aniq ko’riladi. Bo’yalgan filtr qog’ozni saqlab qo’yish mumkin. Agar ajratilgan oqsil miqdorini aniqlash lozim bo’lsa kerakli fraksiya qirqib olinib oqsil eritmaga o’tkaziladi va fotometrik yo’l bilan o’lchanadi. Kraxmal gelidagi elektroforez. Ayrim uslubiy qiyinchiliklar bu elektroforezning keng tarqalishiga monelik qildi. Bunga sabab kraxmal gelini tayyorlash, uni gidroliz qilish ancha murakkab jarayon ekanligidadir. Lekin shunga qaramay kraxmal geli oqsilni ajratishda keng qo’llaniladi, chunki bu uslubga ko’ra oqsillar faqat zaryadlanish darajasiga ko’ragina emas, balki molekulyar og’irligiga ko’ra ham ajratiladi. Bu esa fraksiyalar sonini ko’paytiradi. M: qon zardobi oqsilidan ushbu uslub bo’yicha 8 - 1 0 ta fraksiya olish mumkin. Kraxmal gelidagi elektroforez oqsil gomogenligini bilishda aniq uslub hisoblanadi. Download 51.57 Kb. Do'stlaringiz bilan baham: 
|