Г. А. Тоштемирова1, Н. А. Циферова1,2, С. И. Рустамова

Результаты и их обсуждение. В контрольных условиях было показано, что инкубирование тимоцитов в течение 24 часов приводит к увеличению начальной концентрации клеток на 120–130% по сравнению с моментом времени t=0 (Рис. 1). При этом жизнеспосбность клеток сохранялась на уровне 95-97% (n=19).
При изучении дозозависимого действия ГК на суспензию тимоцитов было показано, что постепенное увеличение концентрации вещества приводило к ингибированию пролиферации клеток по сравнению с контролем. При этом в присутствии ГК в высокой концентрации – 200 мкМ, пролиферация тимоцитов составила 109,7±1,0% (n=4-5), что говорит о снижении скорости пролиферации, однако жизнеспособность клеток при этом сохранялась. Аппроксимация полученных данных уравнением Хилла показала, что полумаксимальный эффект достигается при С₅₀ = 41,2±5,4 мкМ с коэффициентом Хилла, равным 1,5±0,3. (Рис. 1, ромбики). Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что ГК оказывает слабое и лишь частичное ингибирующее действие на пролиферацию тимоцитов крыс, не приводя при этом к смерти клеток.
В следующей серии экспериментов были проведены исследования дозозависимых эффектов агликонов ГК – α-ГлК и β-ГлК на пролиферацию тимоцитов крыс. α-ГлК оказывала небольшое ингибирующее действие на пролиферацию тимоцитов в концентрациях до 25 мкМ. Однако в концентрациях 50 (122±2%) и 100 (131±3%) мкМ эффект почти не наблюдался. При этом в концентрациях 150 (137±3%) мкМ и 200 (141±2%) мкМ уровень пролиферации тимоцитов увеличивался по сравнению с 24-часовым контролем (n=4) (Рис. 2, квадраты). Аппроксимация восходящего участка экспериментальной кривой уравнением Хилла показала, что полумаксимальный эффект достигается при С₅₀ = 70,0±7,5 мкМ с коэффициентом Хилла, равным 2,3±0,4.



Рисунок 1. Дозозависимое влияние ГК и КБХ на пролиферацию тимоцитов крыс. Количество клеток определялось через 24 ч инкубации в среде RPMI-1640. Звездочками (*) отмечены значения, статистически значимо отличающиеся от контроля при Р < 0,05.
Изучение эффекта β-ГлК на пролиферацию тимоцитов продемонстрировало ее сильное ингибирующее действие, которое было заметно уже при низких концентрациях (ниже 25 мкМ, Рис. 2, треугольники). С повышением концентрации вещества подавляющее действие β-ГлК выходило на плато при 100 мкМ, а дальнейшее увеличение дозы препарата приводило к смерти клеток (до 42% при 200 мкМ, n=6). Аппроксимация участка экспериментальной кривой до фазы плато (для концентраций до 100 мкМ) уравнением Хилла показала, что полумаксимальный эффект достигается при С₅₀ = 9,8±0,9 мкМ с коэффициентом Хилла, равным 1,1±0,1 (Рис. 2).
Сравнение эффектов двух стереоизомеров ГлК показывает, что они обладают диаметрально противоположным эффектом: если α-ГлК при дозе выше 100 мкМ является стимулятором клеточного деления, то β-ГлК является сильным ингибитором этого процесса и даже вызывает смерть клеток при концентрациях (выше 100 мкМ), при которых α-изомер, наоборот, стимулирует процесс деления.