Gel-elektroforez o‘tkazish va natijalarni gel-xujjatlashtiruvchi tizimda tahlil qilish

Gel elektroforez nima?
Gel elektroforez asosan zaryadiga, hajmi va shakliga qarab nuklein kislotalarni, oqsillarni yoki aminokislotalarni ajratish uchun ishlatiladigan usul. Ushbu texnikada ajratish vositasi sifatida polimer moddasi bo'lgan fizik Gel ishlatiladi. Eng ko'p ishlatiladigan Geller - agaroza (nuklein kislotasini ajratish uchun) va poliakrilamid (oqsillarni ajratish uchun). Gel elektroforetik apparati Gelni tayyorlash uchun Gel quyish tepsisini, quduqlarni tayyorlash uchun quyma taroqlarni, tamponli tankni, elektrodlarni - musbat (anod) va manfiy (katod) va kuchlanish moslamasini o'z ichiga oladi. Salbiy zaryadlangan DNK yoki RNK kabi molekulalar katoddan anodga, musbat zaryadlangan molekulalar esa aksincha harakatlanadi. Gel tayyorlash talabga muvofiq amalga oshiriladi. Agar yuqori aniqlikdagi yoki molekulalarni ajratish kerak bo'lsa, unda kamroq gözenek hajmiga ega bo'lgan yuqori konsentratsiyali gel tayyorlanishi kerak. Gel matritsasida ajratilgan molekulalar binoni texnikasidan keyin kuzatiladi. Ajratilgan molekulalar gel matritsasida bantlar shaklida paydo bo'ladi.
Gel elektroforez ma'lum bir DNK / RNK yoki oqsil mavjudligini aniqlash uchun DNK barmoq izlari kabi molekulyar diagnostikada qo'llaniladi. Gel elektroforez, shuningdek olingan biomolekula namunasining tozaligini aniqlaydi. Gel elektroforez gibridlashning dastlabki bosqichi va ketma-ketlikdan keyin tasdiqlovchi tahlil sifatida amalga oshiriladi.
Kapillyar elektroforez nima?
Kapillyar elektroforez - bu zaryadga, molekulaning o'lchamiga qarab bir xil bo'linish printsipidan foydalanadigan gel elektroforezidir, ammo kapillyar naychada gel moddasi yoki suyuq polimer yordamida amalga oshiriladi. Kapillyarlar eritilgan kremniydan tayyorlanadi va har bir kapillyar naycha ichki diametri 50-100km va uzunligi 25-100 sm. Namunalar polimer moddasini o'z ichiga olgan kapillyar naycha ichiga yuboriladi va an'anaviy gel elektroforeziga qaraganda ancha tez ajratiladi. Izolyator ko'ylagi ichida kapillyar tizim yaxshi himoyalangan, u namunani har qanday ifloslanishdan himoya qiladi. Kapillyarlar gidroksietil tsellyuloza yoki poliakrilamid kabi yuqori aniqlikdagi gellar kabi suyuq polimerlar bilan to'ldirilishi mumkin. Kapillyar elektroforez katta o'lchamlarni ta'minlaydi; shuning uchun ajratish aniqroq. Kapillyar elektroforez spektrofotometrik tahlil orqali avtomatlashtirilgan detektor tizimini qo'llaydi. Buning sababi sirt maydoni hajm hajmiga nisbati.
Kapillyar elektroforez yuqori aniqlik talab etiladigan holatlarda, masalan, sud-tibbiy ekspertizada, chunki bu juda qimmatga tushadigan texnikaga ega bo'lgani uchun keng qo'llanilmaydi.