Gel-elektroforez o‘tkazish va natijalarni gel-xujjatlashtiruvchi tizimda tahlil qilish

§ ajratishning yuqori ravshanligi va ravshanligi;
§ mikro-namunalarni o'rganish va natijalarni avtomatik ravishda qayd etish;
§ ob'ektlarning keng doirasini tahlil qilish qobiliyati - engil gazlardan tortib yuqori molekulyar og'irlikdagi organik birikmalargacha;
Asosiy nazariy yondashuvlar
Xromatografiya nazariyasining vazifasi xromatografik zonalarning harakat va eroziya qonunlarini o'rnatishdir. Buning uchun ko'pincha quyidagi yondashuvlar qo'llaniladi:
§ nazariy plitalar nazariyasi;
§ kinetik nazariya.
Nazariy plitalar nazariyasi ustun kichik qismlarga - plitalarga bo'linadi degan taxminga asoslanadi. Bular ustunning tor qatlamlari bo'lib, unda harakatchan va statsionar fazalar o'rtasida materiyaning taqsimoti muvozanati o'rnatiladi.
Kinetik nazariya ajratish samaradorligini kolonadagi gaz oqimining harakati tufayli moddaning tarqalish jarayonlari bilan bog'laydi. Ustun bo'ylab harakatlanayotganda, modda mobil fazada yoki statsionar fazada, ya'ni xromatografik jarayon bosqichma-bosqich bo'ladi. Moddaning har ikki bosqichda o'tkazgan vaqtidan boshlab uning ustun bo'ylab harakatlanish tezligi bog'liq.
Xromatografik tepalik parametrlari
Shakl 5 Uch modda aralashmasining xromatogrammasi
1. Saqlash vaqti (tR) - bu tahlil qilingan namunani kiritish vaqtidan boshlab maksimal xromatografik cho'qqini qayd etishgacha bo'lgan vaqt. Bu moddaning xususiyatiga bog'liq va sifatli xarakteristikadir.
2. Balandligi (h) yoki cho'qqisi (S)
Balandligi va cho'qqi maydoni modda miqdoriga bog'liq va miqdoriy xususiyatlarga ega.
Saqlash vaqti ikkita tarkibiy qismdan iborat - moddalarning ko'chma fazada yashash vaqti (tm) va statsionar fazada bo'lish vaqti (ts):
Gaz xromatografining sxematik diagrammasi va asosiy tugunlarning maqsadi
3-namunani kiritishga mo'ljallangan qurilma kolonnadan oldin gaz tashuvchisiga ma'lum miqdordagi tahlil qilingan aralashmaning oqimiga kirishga imkon beradi. U evaporatator va o'lchash moslamasini o'z ichiga oladi.
Gaz tashuvchisi oqimi tahlil qilingan namunani 5-ustunga kiritadi, bu erda aralash alohida tarkibiy qismlarga bo'linadi.
Shakl 6 Gaz xromatografining blok diagrammasi: 1 - gaz tashuvchisi bo'lgan silindr; 2 - gaz tayyorlash moslamasi; 3 - namunani kiritish uchun qurilma; 4 - termostat; 5 - xromatografik ustun; 6 - yassi; 7 - kuchaytirgich; 8 - magnitafon
Ikkinchisi, tashuvchi gaz bilan aralashtirilgan, detektor 6 ga etkaziladi, bu komponentning fizik yoki fizik-kimyoviy xususiyatlarida tegishli o'zgarishlarni toza tashuvchi gaz bilan taqqoslaganda elektr signaliga aylantiradi. Tegishli quvvat manbai bo'lgan detektor aniqlash tizimini tashkil etadi.
Evaporatator, ustun va detektorning zarur harorat sharoitlariga ularni termostatni boshqaradigan mos keladigan termostatlarga 4 joylashtirish orqali erishiladi. Agar tahlil paytida ustunning haroratini oshirish kerak bo'lsa, haroratni o'lchash dasturidan foydalaning. Termostatlar va haroratni boshqarish dasturchisi bilan termostatik tizimni tashkil qiladi, uning ichiga haroratni o'lchash moslamasi ham kiradi.
Kuchaytirgich 7 ga aylantirilgan detektor signali xromatogramma yozuvchisi 8 tomonidan qayd etiladi.
Ko'pincha elektronga integratsiya yoki ma'lumotlarni qayta ishlash uchun kompyuter elektronga kiritilgan.
Xromatografik sharoitlar
Xromatografik tahlilni o'tkazishda tahlil qilinadigan tarkibiy qismlarni ajratish uchun maqbul sharoitlarni tanlash kerak. Qoida tariqasida, ularni aniqlashda ular adabiyot ma'lumotlari asosida harakat qiladilar. Ularning asosida eksperimental ravishda tanlang:
§ gazsimon suyuqlikdagi yoki adsorbsiyali gaz adsorbsion xromatografiyasida statsionar faza;