Gel-elektroforez o‘tkazish va natijalarni gel-xujjatlashtiruvchi tizimda tahlil qilish

Kapillyar elektroforez va gel elektroforez o'rtasida qanday o'xshashliklar mavjud?

• 
  Ikkala usulda ham molekulalarni ajratish molekulaning zaryadiga va hajmiga bog'liq. Ikkala usul ham ikkala nuklein kislotasini va oqsillarni ajratish uchun ishlatilishi mumkin. Ikkala texnikaning namunaviy hajmi bir xil. Ikkala usul ham ajratishni osonlashtirish uchun tampondan foydalanadi.
  

Kapillyar elektroforez va gel elektroforez o'rtasidagi farq nima?
Xulosa - kapillyar elektroforez va Gel elektroforez
Molekulyar diagnostika ilmiy dunyoda katta rol o'ynaydi. DNK, RNK va oqsillarni aniqlash va tozalash diagnostika jarayonlarida hal qiluvchi bosqichdir. Elektroforez - bu ikkala gel elektroforezida va juda rivojlangan kapillyar gel elektroforezida biomolekulalarni ajratib turadigan va aniqlaydigan usul. Gel elektroforez standart gözenek o'lchamidagi polimer Gel yordamida vertikal yoki gorizontal tekislikda, kapillyar elektroforez esa kapillyar naychada polimer suyuqligi yoki Gel yordamida amalga oshiriladi. Bu kapillyar elektroforez va gel elektroforez o'rtasidagi farq. Elektroforez usuli tugagandan so'ng, biomolekulalar gibridlash yoki barmoq izlari kabi yuqori darajadagi ma'lumotlarni olish uchun qayta ishlanadi.

Ajratish va kontsentratsion ma'ruza usullari. Analitik kimyoda moddalarni ajratish, ajratish va konsentratsiya qilish usullari

1. Ajratish va kontsentratsiya usullari
Ajratish va konsentratsiya haqida umumiy ma'lumot
Konsentratsiya - bu namunaning (matritsaning) asosiy qismlariga nisbatan mikrokomponentning kontsentratsiyasini oshirishga imkon beradigan operatsiya.
Agar mikrokomponentning kontsentratsiyasi Cmin aniqlash chegarasidan kam bo'lsa, ya'ni tahlil qilish usuli etarlicha sezgir bo'lmaganda qo'llaniladi. Bunday holda, tarkibiy qismlarning kontsentratsiyasi juda katta farq qiladi. Ko'pincha, kontsentratsiya ajratish bilan birlashadi.
Konsentratsiya turlari.
1. Mutlaq: mikro komponent katta hajmdan yoki namunaning katta massasidan (Vpr yoki mpr) kichikroq hajmga yoki kichikroq kontsentratlar massasiga (Vcon yoki mconc) o'tkaziladi. Natijada mikrokomponentning konsentratsiyasi n marta ko'payadi:
bu erda n - konsentratsiya darajasi.
Kontsentratlar qancha kichik bo'lsa, kontsentratsiya darajasi shuncha ko'p bo'ladi. Masalan, 20 l jo'ka suvdan 50 mg kation almashinuvchisi germaniy tomonidan so'rilgan, keyin germaniy 5 ml kislota bilan desorblangan. Shuning uchun germaniyning konsentratsiyasi quyidagicha edi:
2. Nisbiy (boyitish): mikrokomponent makrokomponentdan ajratiladi, shunda ularning konsentratsiyalari nisbati oshadi. Masalan, boshlang'ich namunada mikro va makrokomponentlarning kontsentratsiyalari nisbati 1: 1000, boyitilganidan keyin esa - 1: 10. Bunga odatda matritsani qisman olib tashlash orqali erishiladi.
Ajratish va kontsentratsiyalashuvning umumiy jihatlari ko'p: bu maqsadlar uchun bir xil usullar qo'llaniladi. Ular juda xilma-xildir. Keyinchalik, analitik kimyoda eng katta ahamiyatga ega bo'lgan ajratish va kontsentratsiya usullari ko'rib chiqiladi.
Ajratish va konsentratsiya usullarini tasniflash
Turli xil xususiyatlarga asoslangan ajratish va kontsentratsiya usullarining ko'plab tasnifi mavjud. Ulardan eng muhimlarini ko'rib chiqing.
1. Jarayonning tabiati bo'yicha tasniflash sek.
Shakl 1 Jarayonning tabiati bo'yicha ajratish usullarini tasniflash
Ajratish va konsentratsiyalashning kimyoviy usullari kimyoviy reaktsiyaga asoslanadi, bu mahsulotning yog'ingarchilik, gaz evolyutsiyasi bilan birga keladi. Masalan, organik tahlilda konsentratsiyaning asosiy usuli distillashdir: termal parchalanish paytida matritsa SO2, N2O, N2 shaklida distillanadi va qolgan kulda metallar aniqlanishi mumkin.
Ajratish va kontsentratsiyaning fizik-kimyoviy usullari asosan materiyaning ikki faza o'rtasida tanlab taqsimlanishiga asoslanadi. Masalan, neft-kimyo sanoatida xromatografiya eng muhimdir.
Ajratish va kontsentratsiyalashning fizikaviy usullari ko'p hollarda moddaning yig'ilish holatini o'zgartirishga asoslanadi.
2. Ikki fazaning jismoniy tabiati bo'yicha tasniflash. Moddani taqsimlash bir xil yoki turli xil agregatsiya holatida bo'lgan fazalar o'rtasida o'tkazilishi mumkin: gazsimon (G), suyuq (G), qattiq (T). Bunga muvofiq quyidagi usullar ajralib turadi (rasm).
Shakl 2 Fazalar tabiati bo'yicha ajratish usullarini tasniflash
Analitik kimyoda moddani suyuqlik va qattiq faza o'rtasida taqsimlashga asoslangan ajratish va konsentratsiya usullari katta ahamiyatga ega.
3. Elementar harakatlar (qadamlar) soni bo'yicha tasniflash.
§ Bir bosqichli usullar - moddani ikki faza o'rtasida yagona taqsimlashga asoslangan. Ajratish statik sharoitlarda amalga oshiriladi.
§ Ko'p bosqichli usullar - materiyaning ikki faza o'rtasida ko'p taqsimlanishiga asoslangan. Ko'p bosqichli usullarning ikki guruhi mavjud:
- bitta tarqatish jarayonining takrorlanishi bilan (masalan, qayta ekstraktsiya). Ajratish statik sharoitlarda amalga oshiriladi;
- bir fazaning boshqasiga nisbatan harakatiga asoslangan usullar (masalan, xromatografiya). Ajratish dinamik sharoitda amalga oshiriladi.
3. Muvozanat turiga ko'ra tasniflash (rasm).
Shakl 3 Muvozanat turiga qarab ajratish usullarini tasniflash
Termodinamik ajratish usullari moddalarning muvozanatdagi xatti-harakatlaridagi farqlarga asoslanadi. Ular analitik kimyoda juda katta ahamiyatga ega.
Kinetik ajratish usullari muvozanat holatiga olib keladigan jarayon davomida moddalarning xatti-harakatlaridagi farqlarga asoslanadi. Masalan, biokimyoviy tadqiqotlarda elektroforez katta ahamiyatga ega. Qolgan kinetik usullar kolloid eritmalarning zarralari va yuqori molekulyar og'irlikdagi birikmalarning eritmalarini ajratish uchun ishlatiladi. Analitik kimyoda bu usullar kamroq qo'llaniladi.
Xromatografik usullar ham termodinamik, ham kinetik muvozanatga asoslangan. Ular analitik kimyoda juda katta ahamiyatga ega, chunki ular ko'p komponentli aralashmalarni ajratish va ayni paytda sifatli va miqdoriy tahlil qilish imkonini beradi.
Ekstraksiya ajratish va konsentratsiya usuli sifatida
Ekstraksiya - bu moddani ikki o'zgarmas suyuq faza (ko'pincha suvli va organik) o'rtasida taqsimlashga asoslangan ajratish va konsentratsiya usuli.
Ekstraksiya ajratish uchun shunday sharoitlar yaratilganki, bitta komponent to'liq organik fazaga o'tadi, boshqasi suvli fazada qoladi. Keyin fazalar ajratuvchi huni yordamida bo'linadi.
Mutlaq konsentratsiya maqsadida modda suvli eritmaning kattaroq hajmidan organik fazaning kichik hajmiga o'tkaziladi, buning natijasida organik ekstraktdagi moddaning konsentratsiyasi oshadi.
Nisbiy konsentratsiya maqsadida mikrokomponentning organik fazaga o'tishi va makrokomponentning katta qismi suvli fazada qolishi uchun shunday sharoitlar yaratiladi. Natijada, organik ekstraktda mikro va makrokomponentlarning kontsentratsiyalari nisbati mikrokomponent foydasiga ortadi.
Ekstraktsiyaning afzalliklari: