«Ихтирога патент олиш: Ўзбекистон Республикасида унинг ҳуқуқий муҳофазаси ва ҳимояси» қўлланмасига


Ихтирога патент олиш: Ўзбекистон Республикасида унинг ҳуқуқий муҳофазаси ва ҳимояси


Download 0.83 Mb.
Pdf ko'rish
bet53/61
Sana13.04.2023
Hajmi0.83 Mb.
#1351076
1   ...   49   50   51   52   53   54   55   56   ...   61
Bog'liq
ixtiroga patent olish

Ихтирога патент олиш: Ўзбекистон Республикасида унинг ҳуқуқий муҳофазаси ва ҳимояси
67 
берилади ва кейин 1-сонли мисолда тавсифланганидек иш тутилади. Қаттиқ кукуннинг 
чиқиши 0,39 г. Олинган транс-4-ТМАЦ-плазмин ва транс-4-плазминстрептокиназа қо-
ришмаси (M.B. 132 300D, 
макс
=272 нм) 2-7 % ацилланмаган ферментларга эга ҳамда изо-
тоник сув муҳити (рН 7.4; 20 фоизли глицерин; 37С) да 6 соат давомида актив фермент ва 
актив мажмуага реактивация қилиниши мумкин. 
4-сонли мисол. 
Цис-4-ТМАЦ-плазмин-стрептокиназа активатор мажмуасини олиш. 
2-сонли мисолда тавсифланган усул билан цис-4-ТМАЦ-плазмин-стрептокиназа 
активар мажмуаси олинади. Ацилациялаш агенти сифатида охирги концентрацияси 0,1 мМ 
бўлган 
макс
=278 HM, є
макс
=2,38-10
4
М
-1
см
-1
) цис-4-(N,N,N-триметиламино)-долчин 
кислотасининг 4-нитрофенил эфири эритмасидан фойдаланилади. Ацелациялаш реакцияси 
70 минут давомида олиб борилади. Кейинчалик 2-сонли мисолда тавсифланганидек иш 
тутилади. Қаттиқ кукуннинг чиқиши 0,27 г., мақсадли маҳсулот таркиби 1,2%. Олинган 
транс-4-ТМАЦ-плазмин-стрептокиназа активатор мажмуи (M.B. 132300D, 
макс
=265 нм) 
10-15% ацилланмаган мажмуага эга ҳамда изотоник сув муҳити (рН 7.4; 20 фоизли 
глицерин; 37С) да 5 соат давомида реактивация қилиниши мумкин. 
5-сонли мисол. 
Транс-4-ТМАЦ-плазминоген-стрептокиназа активатор мажмуасини олиш. 
Таркибида 0,15 М NaCI бўлган рН 7,0 нинг 0.05 трис-HCI буферида стрептокиназа 
(57200 I.U./мл) ва плазминоген (10 мкМ) бўлган эритмага охирги концентраияси 0,1 мМ 
бўлган транс-4-(N,N,N-триметиламино)-долчин кислотасининг 4-нитрофенил эфири 
эритмаси қўшилади ҳамда 60 минут давомида 4С да инкубация қилинади. Кейин эритма 
гельфильтрацияга учрайди ҳамда ҳамда оқсил фракциялар 1-сонли мисолда 
тавсифланганидек лиофилланади. Қаттиқ кукуннинг чиқиши 0,88 г., ацилактиватор 
таркиби 2,1%. Олинган транс-4-ТМАЦ-плазминоген-стрептокиназа активатор мажмуаси 
(M.B. 132 300D, 
макс
=272 нм) 5-10% ацилланмаган мажмуага эга ҳамда изотоник сув 
муҳити (рН 7.4; 20 фоизли глицерин; 37С) сv
2
= 58 мин да актив мажмуага реактивация 
қилиниши мумкин. 
6-сонли мисол. 
Тўқима туридаги плазминогеннинг транс-4-ТМАЦ-активаторини олиш. 
Таркибида 1 мг/мл фермент бўлган тўқимали плазминоген активаторининг 1 мл 
эритмасига таркибида 0,15 М NaCI ва транс-4-(N,N,N-триметиламино)-долчин кислотаси 
(10 мМ) нинг 0,2 мл миқдоридаги 4-нитрофенил эфири заҳиравий эритмаси қўшилади 
ҳамда 10 минут давомида 25С да инкубация қилинади. Ферментга 3-4 минут давомида
0,1 мл ациллаш агенти билан такроран ишлов берилгач, эритма сефадекс G-25 да 4 С да 
гельфильтрация қилинади. Оқсилли фракциялар музлатиб қўйилади ҳамда 40С да 
сақланади, т ўқима туридаги плазминогеннинг транс-4-ТМАЦ-активатори (M.B. 66 300D, 

макс
=272 нм) изотоник сув муҳити (рН 7.4; 20 фоизли глицерин; 37С) актив ферментга 
реактивация қилиниши мумкин. 
7-сонли мисол. 
Транс-4-ТМАЦ-урокиназани олиш. 
1 мл (25 000 I.U./мл) урокиназа эритмаси (М.В. 54000Д, 
макс
=280 нм, Е
1%
1см
=13,6) га 
рН 8,5 нинг 0.05 М трис-HCI буферида охирги концентрацияси 1 мМ бўлган транс-4-
(N,N,N-триметиламино)-долчин кислотасининг 4-нитрофенил эфири эритмаси қўшилади 
ва 30-40 минут давомида 25С да инкубация қилинади. Ацилациянинг бориш жараёни 
фермент экстераза активлигининг тушиб кетиши бўйича кузатиб борилади, бунда 
ацетилглициллизин метил эфирининг 6 мМ эритмаси гидролизининг тезлиги рН-статда 
аликвоталар таъсири остида ўлчаб турилади. Ҳосил бўлган ацилфермент 6-сонли мисолда 
тавсифланганидек ажратиб олинади. Олинган транс-4-ТМАЦ-урокиназа (M.B. 543300D; 



Download 0.83 Mb.

Do'stlaringiz bilan baham:
1   ...   49   50   51   52   53   54   55   56   ...   61




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling