«Ихтирога патент олиш: Ўзбекистон Республикасида унинг ҳуқуқий муҳофазаси ва ҳимояси» қўлланмасига
Ихтирога патент олиш: Ўзбекистон Республикасида унинг ҳуқуқий муҳофазаси ва ҳимояси
Download 0.83 Mb. Pdf ko'rish
|
ixtiroga patent olish
Ихтирога патент олиш: Ўзбекистон Республикасида унинг ҳуқуқий муҳофазаси ва ҳимояси
66 APSAC га қараганда қўшимча ҳодисалар қийматининг камлиги. Тизимли ҳодисаларнинг кам ифодаланганлиги туфайли, таклиф қилинаётган ацилактиватордан периферик қон томирлари тромбозларини даволаш учун, шунингдек ўткир миокард инфарктини индивидуал равишда ёки клиник ҳолатдан келиб чиқиб стрептокиназа билан қ ўшиб даволаш учун фойдаланиш мумкин. ТМАЦ-ҳосила ферментларини олиш усули шундан иборатки, бунда фибринолитик фермент актив марказ бўйича 4-нитрофенил эфири цис- ёки 4-(N,N,N,-триметиламино)- долчин кислотаси трансизомерлари билан ацилланади. Ациллаш 0-25С температурада ва pH 7,0-8,5 да 10-70 минут давомида органик эритгичсиз ўтказилади. Сўнгра олинган ацилфермент таъсирга киришмаган ацилацияланаётган агентдан ва ҳосил бўлган 4-нитрофенол эфиридан гельфильтрация йўли билан ажратиб олинади ва оқсилли фракциялар лиофиллаштирилади. Ихтиро қуйидаги мисолларда таърифланади. 1-сонли мисол. Транс-4-ТМАЦ-плазминни олиш. Инсоннинг 9 мл 15 мкМ плазмини эритмаси (М.В. 85000Д, макс =280 нм, Е 1% 1см =17) га таркибида 0,15 М NaCI бўлган рН 8,5 нинг 0,1 М трис-HCI буферида 1 мл миқдорида транс-4-(N,N,N-триметиламино)-долчин кислотасининг 10мМ эритмали-4-нитрофенил эфири (C 18 H 19 JN 2 O 4 , M.B. 454D, Т пл =190C, макс =278 HM, є макс =2,38-10 4 М -1 см -1 ) HCI pH 3,0 да қўшилади ҳамда 10 минут давомида 25С да инкубация қилинади. Ферментга 5 минут давомида ацелациялаш агенти билан қ ўшимча ишлов берилганидан кейин, реакциялаш қоришмаси G-25 сефадексли колонка устига берилади. Элюент сифатида 0,075 М NaCI (4С) эритмаси ишлатилади.Оқсилли фракциялар лиофиллаштирилади. Таркибида 2,8% ацилплазмин бўлган оқсилли кукуннинг чиқиши 0,33 г. Олинган 4-ТМАЦ-плазмин (M.B. 85 300D, макс =272 HM) 1-1,5 % миқдорида эркин фермент қоришмасига эга ҳамда изотоник сув муҳити (рН 7.4; 20 фоизли глицерин; 37С) да актив плазмин Сv 2 = 82 мин га реактивация қилиниши мумкин. 2-сонли мисол. Транс-4-ТМАЦ-плазмин-стрептокиназа активатор мажмуасини олиш. Инсоннинг 4,5 мл 11,8 мкМ плазминоген эритмаси (М.В. 85000Д, макс =280 нм, Е 1% 1см =17) га таркибида 0,15 М NaCI бўлган рН 8,0 нинг 0.05 трис-HCI буферида стрептокиназа (М.В. 47000Д, макс =280 нм, Е 1% 1см =10) навескаси (300 000 I.U) қўшилади ҳамда қоришма 15 минут давомида 25С да инкубация қилинади. Плазмин-стрептокиназа активатор мажмуасининг ҳосил бўлиш жараёни S-2251 0,6 мМ қоришмаси гидролизининг тезлиги бўйича кузатиб борилади. Активатор мажмуасига 40 минут давомида 25С да транс-4-(N,N,N-триметиламино)-долчин кислотаси (охирги концентрацияси 0,1 мМ) нинг 4-нитрофенил эфири эритмаси билан ишлов берилади. Кейин эритма гельфильтрация қилинади ҳамда оқсил фракциялар 1-сонли мисолда тавсифланганидек лиофилланади. Қаттиқ кукуннинг чиқиши 0,25 г., мақсадли маҳсулот таркиби 2,5%. Олинган транс-4- ТМАЦ-плазминстрептокиназа активатор мажмуи (M.B. 132 300D, макс =272 нм) изотоник сув муҳити (рН 7.4; 20 фоизли глицерин; 37С) Сv 2 = 58 мин да реактивация қилинади. 3-сонли мисол. Транс-4-ТМАЦ-плазмин ва транс-4-плазминострептокиназа қоришмаси активар мажмуасини олиш. 3 мл 25 мкМ плазминогенга таркибида 0,15 М NaCI бўлган рН 8,0 нинг 0.1 М трис- HCI буферида 3 мл стрептокиназа эритмаси (71 500 I.U//мл) қўшилади ҳамда 10 минут давомида 25С да инкубация қилинади. Фермент ва активар мажмуанинг ҳосил бўлган қоришмасига 30-40 минут давомида 25С да HCI pH 3,0 да транс-4-(N,N,N- триметиламино)-долчин кислотасининг 4-нитрофенил эфири 10 мМ эритмаси билан ишлов |
Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling
ma'muriyatiga murojaat qiling