Klinik laborator tashxislash va tekshiruv usullari
Brandberg - Roberts - Stolnikov sinamasi
Download 3.04 Mb. Pdf ko'rish
|
klinik laborator tashxislash va tekshiruv usullari
- Bu sahifa navigatsiya:
- Nofelometrik usul
- Biuretli usul
Brandberg - Roberts - Stolnikov sinamasi
Usul asosida azot kislotasi bilan o ‘tkaziladigan sifatiy sinama yotadi. Sinamani o ‘tkazish ketma-ketligi yuqorida keltirilgan. 2- 3- minutda, qavatlanganidan keyin, ikkita suyuqliklar chegarasida ingichka xalqaning paydo bo‘lishi peshobda 0,033 g/1 oqsil (peshobdagi oqsil konsentratsiyasini, promiile, ya'ni gramm litrga belgilash mumkin) borligidan dalolat beradi. Agar oqsil 2 min dan oldinroq paydo bo‘lsa, siydikni suv bilan aralashtirish kerak. 54 Peshobning azot kislotasiga qavatlanganda xalqa 2-3- minutda paydo bo‘ladigan eritmasi tanlanadi. Suyultirish darajasi xalqaning kengligi va kompaktliligiga, xamda yuzaga kelish vaqtiga bog‘liq. Oqsil konsentratsiyasi peshobni suyultirilish darajasini 0,033 g/1 ga qo‘paytirib topiladi. Roberts - Stolnikov usulida suyultirish qator kamchiliklarga ega: nosub'ektiv, qiyin, oqsil konsentratsiyasini to‘g‘ri aniqlash extimoli, peshob suyultirilgan sayin kamayib boradi. Eng qulay va aniq usullar nofelometrik va biuretli usullar xisoblanadi. Nofelometrik usul Oqsilni sulfosalitsil kislota bilan loyqalanish paydo bo‘lishiga asoslangan, loyqalanish intensivligi oqsil konsentratsiyasiga proporsional. Graduirlangan probirkaga 1,25 ml profiltlangan peshob va 5 ml bo‘lguncha 3% li sulfosalitsil kislotasi solinadi, yaxshilab aralashtiriladi. 5 min dan keyin ekstinksiyani 590-650 nm to‘lqin uzunligida (sabzirang yoki qizil yorug‘filtr), kontrolga qarshi kyuvetda 0,5 sm qalinlikda, FEK-M da oMchanadi (yoki boshqa fotometrda). Nazorat uchun 1,25 ml profiltrlangan peshobdan (xuddi o ‘sha) olinadi, 5 ml bo‘lguncha natriy xloridning izotonik eritmasidan quyiladi. Oldindan, oqsil konsentratsiyasiga qarab, ekstinksiya kattaligiga bog‘liq, kalibrovka egriligi tuziladi. Oqsilning turli konsentratsiyalarini tayyorlash uchun, albuminning standart eritmasidan foydalaniladi (odam yokibo‘qa zardobi). Ishchi jadval to‘ldiriladi. Biuretli usul Oqsilni mis sulfati va o ‘tkir ishqor bilan, siyoxrang biuretli kompleks xosil qilishiga asoslangan, bo‘yalish intensivligi, oqsil miqdoriga to ‘g‘ri proporsional. Oqsil cho‘kishi uchun 2 ml peshobga, 2 ml uchxloruksus kislotasi qo‘shiladi va sentrifugalanadi. Cho‘kma ustidagi suyuqlik to‘kib yuboriladi. Cho‘kmaga (oqsilga) 4 ml 3% li NaOH eritmasi va 0,1 ml 20% mis sulfat eritmasi qo‘shiladi, aralashtiriladi va sentrifugalanadi. Siyoxrang cho‘kma usti suyuqligini 540 nm to iq in uzunligida (yashil yorug‘filtr) , distillirlangan suvga qarshi, 1,0 sm qalinlikdagi kyuvetda fotometrlanadi. Oqsil konsentratsiyasini tajriba usulida olingan jadval yordamida xisoblaniladi (kalibrovka egriligi yuqoridagi usuldagidek tuziladi). Download 3.04 Mb. Do'stlaringiz bilan baham: |
Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling
ma'muriyatiga murojaat qiling