Mavzu: Xromotografik tahlil usullari

Yupqa qatlamli xromatografiya nima uchun kerak?

Yupqa qatlamli xromatografiya aralashmaning bir qismi bo'lgan turli xil moddalarni aniqlash uchun ishlatiladi. Masalan: sutda yoki boshqa moddalarda mavjud bo'lgan bepul aminokislotalarni bilishingiz mumkin.
Yupqa qatlamli xromatografiya oziq-ovqat tarkibidagi lipidlarning turini aniqlashi mumkin. Bundan tashqari, xromatografiyaning turli bosqichlarida reaktivlar va mahsulotlarning mavjudligini aniqlab, organik kimyo reaktsiyasining rivojlanish darajasini bilish uchun foydalaniladi.

Jarayon

Birinchi qadam

Erituvchi aralash xromatografiya kamerasiga, uning balandligi taxminan 1 sm ga etadigan hajmdan foydalanib joylashtiriladi.

Ikkinchi qadam

Xromatografiyani boshlashdan oldin kamerani germetik ravishda yopish va erituvchi bug'larning ichidagi havoni to'ydirishi maqsadga muvofiqdir.

Uchinchi qadam

Chiziq xromatografiya varag'ining bir uchidan 1,5 sm balandlikda grafit qalam bilan yasaladi. Xromatografiyada foydalaniladigan namunalar shisha kapillyar yordamida chiziqqa joylashtiriladi.

To'rtinchi qadam

Keyinchalik, tahlil qilinadigan namunalar bilan xromatografiya varag'i kameraga joylashtiriladi va bu shisha qopqoqni qo'yish bilan yopiladi.

Beshinchi qadam

Erituvchi aralashmaning ko'tarilishi erituvchining old qismi xromatografiya varag'i balandligidan taxminan 2 sm pastroq balandlikka yetguncha kuzatiladi. Keyin xromatografiya varag'i kameradan chiqariladi va uning ustida hal qiluvchi old tomoni chiziq bilan belgilanadi.

Oltinchi qadam

Choyshab quritish uchun pechga qo'yiladi va xromatografiyada mavjud bo'lgan moddalar umumiy vizualizatsiya usuli yoki xromatografiya materialiga xos usul yordamida tahlil qilinadi.

Ettinchi qadam

Rf qiymatlari mavjud bo'lgan turli xil moddalar uchun olinadi va xromatografiya nazorati asosida, shuningdek, ushbu masala bo'yicha adabiyotlar, moddalar aniqlanadi.

4. Qog`oz xromotografiyasi
Qog'oz xromatografiyasi. Qog'ozga bo'linish xromatografiyasi Xromatografik qog'oz. Qog'oz xromatografiyasi. Birinchi so'zdanoq uning qog'ozga aloqasi borligini aytish mumkin; va ikkinchi "xromatografiya" so'zi "rang" (xrom) va "yozish" (grafik) degan ma'noni anglatadi. Ularni qo'shing va siz "qog'ozga rangli yozishni" olasiz. Qog'oz xromatografiyasi fanda eng muhim sinovdir. Rang bo'yicha kimyoviy tarkibini sinchkovlik bilan tahlil qilib, olim boshlang'ich materiallarni osongina aniqlay oladi. Xromatografiya o'rganishga arziydigan narsa aynan kapillyar effekt orqali - suvning qog'oz orqali tarqalishi orqali amalga oshishini ko'rish oson. Ustun - xromatografik sorbentni o'z ichiga oladi, aralashmani alohida komponentlarga ajratish vazifasini bajaradi. Eluent - mobil faza: gaz, suyuq yoki (kamdan -kam hollarda) superkritik suyuqlik. Statsionar faza - bu inert tashuvchiga bog'langan qattiq faza yoki suyuqlik; adsorbsion xromatografiyada sorbent. Xromatogramma - bu komponentlar kontsentratsiyasining kolonadan chiqish vaqtiga bog'liqligini qayd etish natijasi. Detektor - kolonkaning chiqish qismidagi aralashma komponentlarining kontsentratsiyasini qayd qilish qurilmasi. Xromatograf - xromatografiya uchun asbob. Pastga tushuvchi xromatografiya Mobil fazaning pastga qarab harakatlanish usuli Ko'tarilgan xromatografiya Mobil fazaning yuqoriga ko'tarilish usuli Gorizontal xromatografiya Mobil fazaning gorizontal harakatlanishi Dumaloq xromatografiya Harakatlanuvchi fazaning aylananing o'rtasidan o'rtasiga o'tish usuli. uning aylanasi Oqim xromatografiyasi, uning old qismi qog'oz oxirigacha yetganidan keyin ham davom etadi. Takroriy xromatografiya Mobil fazaning birinchi avansi tugagandan so'ng, xromatogramma quritiladi va xromatografiya takrorlanadi ( ba'zan bir necha marta) Xromatogramma tashuvchisi xromatografik qog'ozidagi moddalarni aniqlash uchun ishlab chiqish usuli. Pastga tushuvchi xromatografiya Mobil fazaning pastga qarab harakatlanish usuli Ko'tarilgan xromatografiya Mobil fazaning yuqoriga ko'tarilish usuli Gorizontal xromatografiya Mobil fazaning gorizontal harakatlanishi Dumaloq xromatografiya Harakatlanuvchi fazaning aylananing o'rtasidan o'rtasiga o'tish usuli. uning aylanasi Oqim xromatografiyasi, uning old qismi qog'oz oxirigacha yetganidan keyin ham davom etadi. Takroriy xromatografiya Mobil fazaning birinchi avansi tugagandan so'ng, xromatogramma quritiladi va xromatografiya takrorlanadi ( ba'zan bir necha marta) Xromatogramma tashuvchisi xromatografik qog'ozidagi moddalarni aniqlash uchun ishlab chiqish usuli. Qog'ozdagi xromatografiya (miloddan avvalgi)
Birinchi marta 1943 yilda aminokislotalarni ajratish va identifikatsiyalashda qog'oz xromatografiya usuli ishlatilgan. Ajratish jarayonining xususiyatiga qarab, miloddan avvalgi BC odatda taqsimot, adsorbsiya va ion almashinuvi deb tasniflanadi. BH texnikasi
(shuningdek, yupqa qatlamli xromatografiya) oddiy va samarali bo'lib, u tahlil qilinadigan moddalarning kerakli iz miqdori bilan birgalikda bu usulning keng qo'llanilishini tushuntiradi.
Qog'ozdagi xromatografiyada analitlarning bo'linishi qog'oz tsellyulozada adsorbsiyaning bir necha marta sodir bo'lishi (yoki suvni singdiruvchi qog'ozga singishi) natijasida sodir bo'ladi - statsionar fazada va eritma eritmasiga desorbtsiya qilish harakatlanuvchi fazada. Qog'oz bir xil zichlikda, kimyoviy va adsorbsion neytral bo'lishi kerak. Hozirgi vaqtda Rossiya sanoati 1, 2, 3, 4 raqamli to'rt turdagi xromatografik qog'ozni ishlab chiqaradi. Har bir raqam zichligi, shuning uchun hal qiluvchi harakat tezligi bilan farq qiladi. 1 va 2 -sonli hujjatlar "tez", 3 -chi va 4 -chi "sekin" deb nomlanadi. Bundan tashqari, ular qog'ozning maxsus navlarini ishlab chiqaradi yuqori tarkibli karboksil guruhlari (kationlarni ajratish uchun), shuningdek ion almashinuvchilari yoki boshqa adsorbentlari bo'lgan qog'ozlar.
Bu jarayon quyidagicha davom etadi. Moddalar aralashmasi bo'lgan eritma tomchisi xromatografik qog'oz tasmasiga surtiladi va quritiladi. Keyin qog'ozning bir uchi mos hal qiluvchi solingan idishga botiriladi va mahkam yopiladi.
Qog'oz tasmasi bo'ylab kapillyar kuchlar ta'sirida harakat qiluvchi hal qiluvchi tahlil qilingan aralashmaning tarkibiy qismlarini ushlaydi. Sorbtsiya - desorbtsiya jarayonlari natijasida aralash alohida komponentlarga bo'linadi. Yupqa qatlamli xromatografiyada bo'lgani kabi, ajratish sifati komponentlarning taqsimlanish koeffitsientlariga bog'liq - R /, ularning qog'ozdagi nisbiy tezligini tavsiflovchi. Qog'ozda sifatni ajratish uchun qiymatlar R / komponentlar 0,05-0,85 oralig'ida bo'lishi kerak.
Xromatografik qog'ozda tahlil qilish usuli nozik qatlamli xromatografiya usuliga o'xshaydi. Buning bir nechta variantlari bor: bir o'lchovli, ikki o'lchovli, dumaloq va elektroforetik. Yupqa qatlamli xromatografiyada bo'lgani kabi, 1-D va 2-D xromatografiya erituvchi oqimining yuqoriga yoki pastga tushishini nazarda tutadi.
To'g'ri hal qiluvchi tanlash kifoya qiyin vazifa... Bu komponent, shuningdek, analitlar, kutupluluk va hidrofilik xususiyatlarida keskin farq qilmasligi kerak, aks holda ular boshlang'ich chiziqda qoladi yoki erituvchi jabhasi bilan birga harakatlanadi. Agar o'rganilayotgan tizimning moddasi boshlang'ich chiziqda qolsa, bu uning mobil fazada past eruvchanligidan dalolat beradi, bu holda ko'proq qutbli erituvchidan foydalanish kerak. Agar, aksincha, modda hal qiluvchi jabhasi bilan birga harakat qilsa ( /? / = 1), demak u statsionar faza bilan kuchsiz ta'sir o'tkazadi va tahlil uchun kamroq qutbli erituvchini tanlash kerak. Yuqori hidrofil moddalar uchun suv miqdori yuqori bo'lgan aralashmalar ishlatiladi, masalan, suv bilan to'yingan ikkilamchi butanol, n-butanol, sirka kislotasi va suv aralashmasining yuqori fazasi (4: 1: 5), izopropanol-ammiak tizimi. , sirka kislotasi 15%va boshqalar.
Suvdan etilatsetat bilan olinadigan, lekin benzol bilan olinmagan o'rta gidrofilik moddalar o'rta qutbli erituvchilar yordamida xromatografiya qilinadi, masalan, butilatsetat yoki xloroform, ozgina qutbli moddalar yoki suv qo'shilgan holda.
Suvda deyarli erimaydigan moddalarni ajratish uchun, odatda, elenuvchi sifatida benzol yoki sikloheksan ishlatiladi.
Ba'zida, tahlil qilinadigan aralashmadagi moddalarning xususiyatlarini baholash uchun u o'tkaziladi dastlabki xromatografiya(odatda butilatsetatda - suv tizimida). Shu tarzda o'rnatilgan qiymatlarga bog'liq R / keyin analitlar ko'proq qutbli yoki qutbsiz aralashmalar sifatida tanlanadi.
Yupqa qatlamli xromatografiyada bo'lgani kabi, alohida komponentlarni aniqlash uchun xromatogrammalar tegishli reagentlar bilan ishlanadi, ularning o'zaro ta'sir o'tkazilgan aralashmaning tarkibiy qismlari bilan aralashmasi rangli birikmalar hosil qiladi. Miqdoriy aniqlash, namuna va standartlarning dog'larining rang intensivligi yoki lyuminestsentligini vizual taqqoslash yoki xromotogrammada uning miqdori va uning nuqtasi kattaligi o'rtasidagi bog'liqlikni oldindan aniqlab, nuqta hajmini o'lchash yo'li bilan amalga oshiriladi. . Xromatografik dog'lardan keyingi fizik -kimyoviy tahlil bilan moddalarni ajratish ham mumkin.