Mesobuthus eupeus chayon zaxrining quyi molekulyar biologic faol fraksiyalarini o’rganish
Download 378.5 Kb.
|
4-5-vazifa Fazliddinov Sh
- Bu sahifa navigatsiya:
- 2.1.1 Hajmini istisno qilish xromatografiyasi
- 2.1.2 O’zgaruvchi fazali yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi
|
O’ZBEKISTON RESPUBLIKASI OLIY VA O’RTA MAXSUS TA’LIM VAZIRLIGI ТОSHКЕNТ КIMYO-ТЕХNОLОGIYAINSТIТUТI UDК 577.322.2 Fazliddinov Shamsiddin Jamoliddin o’g’li Mesobuthus eupeus chayon zaxrining quyi molekulyar biologic faol fraksiyalarini o’rganish 70710201(5A320501) BIOTEXNOLOGIYA (oziq-ovqat, oziqa, kimyoviy mahsulotlar va qishloq xo’jaligi uchun biopreparatlar) Magistr
dissertatsiya Ilmiyrahbar: K.f.n. dotsent Ishimov U.J. Тошкент-2022 2-bob. Tadqiqotlar metodikasi2.1.1 Hajmini istisno qilish xromatografiyasi M. eupeus va O. scrobiculosus chayonlarining muzlatilgan quritilgan butun zahar namunalari 300 µl B1 eritmasida eritildi va TSK 2000SW ustuniga (7,5 600 mm) yuklandi. P-3500 xromatografidan foydalanib, B1 elyusiya eritmasi kolonkaga 0,5 ml/min tezlikda o’tkazildi, avval gazsizlantiruvchidan o'tkazildi. Aniqlash Waters 2489 detektori yordamida va MultiChrome dasturi bilan jihozlangan kompyuterda ro'yxatdan o'tgan holda 210 nm da eluatning optik zichligi bilan amalga oshirildi. Kolonka etil spirti bilan yuvilgan. Rekombinant oqsillarni tozalash uchun o'lchamni istisno qilish xromatografiyasi ham ishlatilgan, ammo F1 eritmasi (PBS) eluent sifatida xizmat qilgan. 2.1.2 O’zgaruvchi fazali yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi Hajmi chiqarib tashlash xromatografiyasidan so'ng olingan fraktsiyalar Vydac 218TP54 C18 analitik kalonkada (4,6 × 250 mm) Waters 2489 detektori bilan jihozlangan Waters 1525 gradient xromatografi yordamida ajratildi. Xromatografiya uchun A1 va B2 eritmalari ishlatilgan. Namunalar kalonkaga yuborilib, A1 boshlang'ich eritmasiga o'tkazildi. Ajratish B2 eritmasining chiziqli gradientida amalga oshirildi: 60 daqiqa davomida 0 dan 60% gacha va 1,0 ml / min oqim tezligi. Aniqlash eluatning optik zichligi 210 va 280 nm da Breeze 2.0 dasturiy ta'minoti bilan jihozlangan kompyuterda ro'yxatdan o'tgan holda amalga oshirildi. Izolyatsiya qilingan birikmalarni yakuniy tozalash uchun RP-HPLC tomonidan o'zgartirilgan sharoitlarda qo'shimcha ajratish ishlatilgan: bir xil Vydac C18 kalonkasida, amalga oshirildi. Eluent sifatida B4 eritmasidan foydalanganda namunalar A boshlang'ich eritmasida qo'llanilgan Download 378.5 Kb. Do'stlaringiz bilan baham: 
|