B- limfotsitlami EAS-rozetka usulida aniqlash
Odam qonidagi В - limfotsitlami aniqlashdagi eng oddiy usullardan bir hisoblanadi. B- limfotsitlar membranasida komplementning C3 fraksiyasiga retseptor mavjud, reaksiya shu komplementni B- limfotsitlar
171
tomonidan biriktirib olishga asoslangan. B- limfotsitlar C3 komplementni biriktirib olsa reaksiya ko'zga ko‘rinmaydi. Reaksiya ko'rinishi uchun komplement eritrotsitlarga adsorbsiyalanadi.
Komplementning eritrotsitar antitela kompleksini tayyorlash.
odam eritrotsitlari (1-guruh va rezus manfiy) uch marotaba 199 oziqli muhitda sentrifugada yuviladi (1000 ayln/daqiqa);
yuvilgan eritrotsitning 2,5% aralashmasidan 2 ml olinadi va subagglyutinatsiyagacha nisbatan suyultiralgan quyonning qon zardobi teng miqdorda qo'shiladi va 30 daqiqa 37°C termostatda saqlanadi;
aralashmaga 0,1 ml sichqonning normal qon zardobidan tomiziladi (komplement manbasi) va 30 daqiqa yana termostatda saqlanadi;
aralashma bir marotaba 199 oziqli muhit bilan 800 ayln/daqiqa, 5 daqiqa sentrifugada yuviladi. Komplement biriktirilgan eritrotsitning 1 ml dagi miqdori 100 x 106 ga yetkaziladi.
Do'stlaringiz bilan baham: |