Oblast záření λ (μm) ṽ (cm-1) V (Hz) e (eV) typ excit metoda

proteiny albumin

aminokys. tryptofan, tyrosin, fenylalanin

imunologic. fluoresk. antigeny, protilátky

enzymy dehydrogenázy, transaminázy, fosfatázy

drogy barbituráty, salicyláty, LSD

metabolity krevní cukr, porfyriny

vitamíny A, B1, B2, B6, C, D, E

léčiva antibiotika, antimalovika

OBLAST VZORKY PŘÍKLADY

• OBLAST VZORKY PŘÍKLADY

• ZEMĚDĚL. jako ANORG.

• POTRAVINY + přír. látky chlorofyl, pigmenty

• proteiny v mléce

• pesticidy DDT

OBLAST VZORKY/METODY PŘÍKLADY

• OBLAST VZORKY/METODY PŘÍKLADY

• PÉČE kontaminované mat. insekticidy

• O ZDRAVÍ bakteriolog. vzorky počítání bakterií

• (EKOLOGIE) intoxikované – TK Be, Cd, Pb

• imunolog. vzorky protilátky

• screening histidinemie

• PRŮMYSL stopovací techniky měření rychlosti průtoku,

• míchání, oběh (cirkulace)

• SOUDNÍ drogy LSD, salicyláty

• EXPERTIZY jedy guinacvin (atebrin)

• stáří orgánů přirozená fluorescence

• oleje, tuky mazací střelné zbraně, oběti

OBLAST VZORKY/METODY PŘÍKLADY

• OBLAST VZORKY/METODY PŘÍKLADY

• ZNEČIŠTĚNÍ kationty, anionty

• VODY A pesticidy DDT

• VZDUCHU stop. techniky rychlost průtoku

• (ENVIRONMENT. aromáty ve spol. pyren, chrysen, benzpyren

• ANALÝZA)

Stanovení prvků na bázi chelátů s org. činidly nebo ternárních komplexů

• Stanovení prvků na bázi chelátů s org. činidly nebo ternárních komplexů

• činidla: polyhydroxyflavony, 8-hydroxychinolin, dihydroxyazobarviva, azomethiny od aromatických hydroxyaldehydů (salicylaldehyd), hydroxyarylhydrazony, rhodamin B, polyfenoly, fenolkarbonové kyseliny, benzoin
• vhodné ionty prvků: el. konfigurace s2p6, s2p6d10 žádné vakantní d-orbitaly: Al3+, Ga3+, In3+, Be2+, BIII, ZrIV, HfIV, ThIV, Sc3+, GeIV, SnIV, Zn2+, Ca2+, Mg2+, La3+, Y3+, lanthanoidy
• lanthanodiy (Tb, Eu) s polyfenoly, 1,10-fenanthrolinem, 1,3-enoliz. diketony, 2-thenoyltrifluoraceton
• skleněné kyvety – fial. fluorescence – nelze použít
• i křemenné kyvety ≈ 380 nm, když λexc ≈ 220-280 nm

zhášení fluorescence: voda z PE střiček, nečistoty

• zhášení fluorescence: voda z PE střiček, nečistoty
• i vznik nežádoucí fluorescence

výtěžek fluorescence

• výtěžek fluorescence
• kvantový výtěžek
• energetický výtěžek

Fluorimetrická indikace ekvivalenčního bodu při EDTA titraci

• Fluorimetrická indikace ekvivalenčního bodu při EDTA titraci

• stanovení Ca2+, Sr2+, Ba2+ v přítomnosti fluorexonu při pH = 12, fluoreskují cheláty indikátoru

• Fluorescenční acidobazické indikátory

• α-naftalamin pH 3,4-4,8, kys.f.(-) → alk.f. fialová
• chininbisulfát pH 3,0-5,0, kys.f. modrá → alk.f. fialová
• akridin pH 4,8-6,6, kys.f.zelená → alk.f. modrá

Redukční fluorescence

• Redukční fluorescence

• některé ionty přechod. prvků po redukci NH2OH nebo amalg Zn (Cu+, Fe2+, V2+) redukují aromatické karbonové kyseliny (kys. ftalová, benzoová, 1,3-benzendikarbonová) na radikál → peroxokyselina (modrá f.) stanovení paramagnetických iontů

• Oxidační fluorescence

• Hg2+ oxiduje Thiomin (pH = 7-8) → Thiochrom (fluor.)

• Stanovení organických sloučenin

• xanthenové deriváty (fluorescein, rhodamin)
• porfyrin, alkaloidy, hormody, vitamíny, anthracen, fenanthren, salicylan, acetylsalicylová kyselina …

nízké teploty (77 K, 10-15 K) – jemná struktura emisních (fluorescenčních) maxim na pozadí emisního pásu

• nízké teploty (77 K, 10-15 K) – jemná struktura emisních (fluorescenčních) maxim na pozadí emisního pásu

• aromáty, polykondenzáty

• měření ve ztuženém stavu rozpouštědel (N-alkany)

• šířka maxim 10 cm-1, měří se:

• naftalen v N-pentanu

• benzpyren, antracen v N-heptanu

• naftacen v N-nonanu

• pyren v N-hexanu

• koronen v N-oktanu

Polykondenzované kancerogenní uhlovodíky

• Polykondenzované kancerogenní uhlovodíky

• CD = 10-11 g org. sloučeniny
• experimentální uspořádání:
• excitační zdroj: laser
• dispersní záření: mřížkové monochromátory
• kyveta: Ø 3 mm křemenná trubička (do Dewar. nádoby)
• vhodné jako detekce k separačním metodám:
• TLC, GC, HPLC

TAVENINY

• TAVENINY

• intenzivní zelenožlutá fluorescence UO22+ v taveninách 30% NaF + 70% (Na-K)CO3; 98% NaF + 2% LiF; 10% NaF + 45% K2CO3; roztavená směs se zahřívá 10 minut při 650°C a nechá se pomalu vychladnout
• excitace 300 nm, emise 538, 555, 576, 601 nm
• CD = 10-8 g U v 50 mg taveniny, ruší některé kovy
• geologie, biologické tekutiny