DNK dezoksiribozalarga xos bo‘lgan rangli reaksiyalar orqali aniqlanadi. Ko‘pincha
difenilamin bilan boradigan reaksiya qo‘llaniladi
(C6Hs-NH-C6Hs). Difenilamin dezoksiriboza yoki DNK bilan ko‘k rangli,
riboza yoki
RNK bilan yashil rangli birikma hosil qiladi.
Dezoksiribonukleoproteid cho‘kmasining bir qismi probirkaga solinadi va 0,5-1ml
NaOH qo‘shiladi (cho‘kma eriguncha). Eritmaga teng
hajmda difenilamin reaktivi
qo‘shildi. Reaksiya boshida hosil bo‘lgan cho‘kma reaktivning
keyingi porsiyalari
yordamida eritiladi, so‘ng 15-20 daqiqa davomida suv hammomida qizdiriladi. Natijada
ko‘k rang hosil bo‘ladi.
Polipeptidlarni aniqlash reaksiyasi: Filtratdan 1 ml olib, unda Biuret reaksiyasi o‘tkazib
ko‘rish kerak. Buning uchun filtrat ustiga I ml o‘yuvchi natriy eritmasidan solinadi va 1-2
tomchi mis sulfat eritmasidan tomiziladn. Natijada qizil-binafsha yoki ko‘k-binafsha rang
hosil bo‘ladi.
Purin asoslarini aniqlash reaksiyasi: 2 ml filtratga kontsentrlangan
ammiak eritmasidan
ishqoriy muhit hosil bo‘lguncha solinadi (bu jarayon lakmus qog‘ozi
bilan tekshirib
turiladi). Uning ustiga 1 ml kumush oksidining ammiakli eritmasidan qo‘shiladi. Bir
necha minutdan so‘ng purin asoslarining kumushli tuzining oq pag‘a-pag‘a cho‘kmasi
hosil bo‘ladi
Darsning maqsadi: Piyoz gomogenatini tayyorlash, DNKni etanol tasirida cho’ktirish va
DNKni eritmadan ajratib olish usullari bilan tanishish.
DNKni ajratish. O‘tkaziladigan tajriba yordamida qurollanmagan ko‘z
bilan nuklein
kislotalarni ajratishning oddiy va tezkor usuli amalga oshiriladi.
Kerakli materiallar: piyoz; shisha qum; ohak; etanol; xovoncha; mufel pech; tarozi; 5%
NaCl; etil spirti yoki izopropilen
spirti muzlatilgan holda, hech bo‘lmasa yuzi
muzlatilgan bo‘lishi maqsadga muvofiqdir; shisha voronka; bir martalik qog‗oz salfetka;
yog‗och tayoqcha; disstillangan suv; shisha stakan, kimyoviy probirkalar.
Do'stlaringiz bilan baham: