Streptomitsin dori vositasini gaz suyuqlik xromatografik usulda aniqlash

Amaliy foydalanish
Gaz xromatografiyasi yetarlicha uchuvchanlikka ega boʻlgan (400S
gacha boʻlgan harorat oraligʻida parchalanmasdan distillangan) turli
birikmalarni, jumladan, dorivor moddalarni ajratish, aniqlash va
miqdorini aniqlash uchun qoʻllaniladi. GK usuli, agar ularni uchuvchan
hosilalarga aylantirish usuli ma'lum bo'lsa, past uchuvchan moddalarni
aniqlash uchun ham qo'llanilishi mumkin.
Gaz xromatografiyasi, agar moddaning termik yo'q qilish jarayoni yaxshi
takrorlanadigan bo'lsa, qizdirilganda parchalanadigan moddalarni
aniqlash uchun ishlatilishi mumkin.
16

---

Sifatli gaz xromatografik tahlili
Moddaning tabiati to'g'risidagi sifatli ma'lumotlar xromatografik
saqlanish xususiyatlari bilan ta'minlanadi, masalan, tuzatilgan saqlash
hajmi yoki tuzatilgan saqlash vaqti. Boshqa usullarda bo'lgani kabi,
ishonchli
identifikatsiya
qilish
uchun
noma'lum
moddaning
xususiyatlarini va bir xil sharoitlarda olingan taxmin qilingan tarkibning
(agar mavjud bo'lsa) moddasini solishtirish tavsiya etiladi.
Oxirgi qiymat juda muhim, chunki xromatografik ushlab turish
parametrlari tajriba sharoitlariga juda bog'liq. Bu shartlar, xususan:
●
ustun harorati
●
tashuvchi gazning oqim tezligi;
●
tashuvchi gazning tabiati;
●
ustundagi gaz tushishining kattaligi;
●
statsionar fazaning xarakteri va miqdori;
●
ustun o'lchamlari.
Agar ma'lum saqlash hajmlari qiymatlari qo'llanilsa, printsipial jihatdan,
ushbu omillarning ba'zilarining ta'sirini istisno qilish mumkin. Biroq, bu
qiymatlarni aniqlash ko'pincha uzoq va mashaqqatli tajribani talab
qiladi. Shuning uchun, odatda, mutlaq belgilar o'rniga nisbiy ushlab
turish xususiyatlari qo'llaniladi. Bundan tashqari, identifikatsiya qilish
uchun spektroskopik aniqlash usullarini qo'llash juda qulaydir, bu
o'z-o'zidan ko'pincha moddaning tabiati va tarkibi haqida qo'shimcha
ma'lumot
beradi.
Buning
uchun
qoida
tariqasida
massa
spektroskopiyasi qo'llaniladi. [6]
Sifatli xromatografik tahlil amaliyotida ko'pincha tahlil qilinayotgan
namunadagi moddalarning (uglevodorodlar, spirtlar, aldegidlar va
boshqalar) guruhga mansubligini aniqlash va aralashmaning tarkibiy
qismlarini aniqlash vazifalari hal qilinadi.
Sifatli tahlil nisbiy (kamaytirilgan) tutilishlar (hajm yoki vaqt) usuli bilan
yoki guvoh moddalar yordamida amalga oshiriladi.
17

---

3-rasmda uch komponentdan iborat tahlil qilinayotgan aralashmaning
tipik xromatogrammasi ko'rsatilgan. Xromatogrammada tahlil qilinadigan
namunaning har bir komponenti cho'qqiga to'g'ri keladi.
Tajriba davomida doimiy ustun harorati (izotermik xromatografiya) va
tashuvchi gaz tezligini saqlab turganda, asosiy sifat ko'rsatkichlari tahlil
qilinadigan moddaning ushlab turilgan hajmi (ushlab turish hajmi) (VR)
va ushlab turish vaqti (tR) hisoblanadi (4-rasm).
Hajmlar va saqlash vaqtlari faqat bitta asbobda qat'iy belgilangan
sharoitlarda tahlil o'tkazilganda birikmani sifat jihatidan tavsiflash uchun
ishlatilishi mumkin. Saqlash hajmlarining olingan qiymatlarini adabiyot
ma'lumotlari bilan yoki boshqa asbobda yoki boshqa sharoitlarda (bir xil
statsionar faza va ustun harorati uchun) olingan ushlab turish hajmlari
qiymatlari bilan solishtirish uchun tuzatish kiritish kerak. namuna
komponentlarini yuvishda ishtirok etmaydigan tashuvchi gazning hajmi
(kamaytirilgan ushlab turish hajmidan foydalaning, VIr).
Ushbu parametrlarning qiymatiga quyidagi omillar ta'sir qiladi:
●
statsionar fazaning tarkibi, xossalari va miqdori (qattiq tashuvchi
va undagi erituvchi);
●
tajriba uchun shartlar - ustunning harorati va tashuvchi gazning
tezligi;
●
ishlatiladigan asbob-uskunalarning dizayn xususiyatlari;
●
dozalash usuli va dozasi;
●
tashuvchi gazning tabiati, shuningdek, kolonkaning kirish va
chiqish joylarida tashuvchi gazning bosim farqi.
Noma'lum va standart birikmalarning saqlanish qiymatlarining mos
kelishi bu birikmalarning bir xil bo'lishi mumkinligini ko'rsatadi. Kattaroq
ishonchlilik uchun turli xil statsionar fazali ustunlar bo'yicha ularning
xromatografik harakati to'g'risida ma'lumotlar qo'shimcha ravishda
olinadi. Agar bunday hollarda standart va noma'lum moddalarning
xromatografik harakati bir xil bo'lsa, identifikatsiyalashning ishonchliligi
99,0% gacha oshadi.
18

---

Saqlash
parametrlari
bo'yicha
identifikatsiya
qilish
yaxshi
takrorlanuvchanlik bilan tavsiflanadi, nisbiy standart og'ish 2,0% dan
oshmaydi.
Ko'pincha identifikatsiya nisbiy ushlab turish orqali amalga oshiriladi
(tR 0TH., Vr rel..), ya'ni. Belgilangan komponentni qisqartirilgan saqlash
vaqti (hajmi) standart sifatida qabul qilingan moddaning qisqargan
saqlash vaqtiga (hajmiga) nisbatan:
Bu qiymat faqat mobil va statsionar fazalar tarkibiga bog'liq.
Ko'pincha
moddalarning
saqlanish
xususiyatlariga
asoslangan
identifikatsiya, ayniqsa tadqiqot ishlarida muvaffaqiyatsiz va etarli
bo'lmagan bo'lib chiqadi.
Hozirgi vaqtda gaz xromatografiyasining asosiy yo'nalishi tabiiy
birikmalar va biologik materiallarning murakkab aralashmalarini
o'rganishdir. Bunday hollarda izolyatsiya qilingan standart birikmalar
odatda yo'q va tahlil qilingan aralashmaning bir qator komponentlari
deyarli har doim noma'lum. Bunday holda, ba'zi komponentlarning
cho'qqilarini bir-birining ustiga chiqishi yoki noto'g'ri aniqlashi istisno
qilinmaydi.
Shu sababli, hozirda selektiv detektorlarni ishlab chiqishga katta e'tibor
berilmoqda va xromatografik tahlil spektrometrik tahlil, asosan, massa
spektrometriyasi bilan to'ldiriladi. Shu bilan birga, tahlil qilinadigan
komponentlarni saqlanish xususiyatlariga ko'ra aniqlash (ushlash vaqti,
ushlab turish hajmi, nisbiy ushlab turish hajmi va boshqalar) ko'pincha
qo'llaniladi, chunki bu usul murakkab xromatografik uskunalarni talab
qilmaydi.
Saqlash xususiyatlariga asoslangan bir nechta identifikatsiya variantlari
mavjud.
Variantlardan biri tahlil qilingan va mos yozuvlar aralashmalarini bir xil
sharoitlarda solishtirishdir.
19

---

Ikkala aralashmaning mos keladigan tarkibiy qismlarining cho'qqilarini
saqlash vaqtlarining tengligi identifikatsiya qilish uchun asos bo'lib
xizmat qilishi mumkin.
Yana bir variant (yorliq, qo'shimcha usul) - o'rganilayotgan aralashmaga
mos yozuvlar komponenti kiritiladi, bu aralashmada mavjudligi kutiladi.
Masalan, ajratiladigan aralashmada metanol borligini nazorat qilish
kerak. Belgilash usuliga ko'ra, bu holda tahlil qilingan namunaning
xromatogrammasi olinadi (a), so'ngra metanol cho'qqisini aniqlash
uchun unga metanol standarti qo'shiladi va takroriy xromatogramma
olinadi (b) (6-rasm). Ikkala xromatogrammani solishtirganda, takroriy
xromatogrammada (b) 3,5 daqiqa ushlab turish vaqti bilan
komponentning cho'qqisi sezilarli darajada oshganligi aniqlandi.
Shuning uchun tahlil qilingan namunada metanol mavjud, ammo oz
miqdorda degan xulosaga kelish mumkin.
Hozirgi vaqtda turli xil birikmalar uchun nisbiy ushlab turish hajmlari
bilan ko'plab jadvallar mavjud. Tahlil qilinayotgan aralashma tegishli
jadvalda ko'rsatilgan shartlar bo'yicha ustunga ajratiladi va aralashmaga
birinchi navbatda standart sifatida xizmat qiluvchi oz miqdordagi
moddalar (masalan, so'rilmaydigan gaz, havo) kiritiladi. Olingan
xromatogramma asosida nisbiy ushlab turish hajmlari yoki boshqa
xususiyatlar hisoblab chiqiladi, olingan qiymatlar jadval ma'lumotlari
bilan taqqoslanadi.
Gaz xromatografiyasining IQ-spektroskopiya va massa-spektrometriya
bilan kombinatsiyasi samarali ekanligini isbotladi. Birinchi holda,
xromatografik
jihatdan
ajratilgan
komponentlar
spektrofotometr
kyuvetasiga joylashtiriladi va spektr olinadi. Tahlil qilinadigan moddalar
spektrlar katalogi yoki mos yozuvlar moddalari bilan aniqlanadi.
Mass-spektrometriya yordamida aniqlanganda, xromatografik ustun
massa spektrometriga ulanadi. Olingan massa spektrlari kataloglarda
mavjud bo'lganlar bilan taqqoslanadi. Ushbu taqqoslash asosida tahlil
qilinadigan aralashmaning tarkibiy qismlarini to'g'ri aniqlash amalga
oshiriladi.
20

---