Streptomitsin dori vositasini gaz suyuqlik xromatografik usulda aniqlash

Miqdoriy tahlil
Ilmiy-tadqiqot amaliyotida va ayniqsa zavod va hududiy nazorat-tahlil
laboratoriyalarida miqdoriy gaz xromatografik tahlillarini o'tkazishga
ehtiyoj katta.
Miqdoriy gaz xromatografik tahlili quyidagilarga imkon beradi:
ko'p komponentli aralashmada bir, bir nechta yoki barcha
komponentlarning tarkibini aniqlash;
qandaydir
umumiy
xususiyat
bilan
birlashtirilgan
bir
nechta
komponentlar guruhlarining umumiy tarkibini aniqlash;
alohida kimyoviy birikmalardagi mikroifratlarni aniqlash.
Xromatogrammaning
tahlil
qilinayotgan
komponent
miqdorini
tavsiflovchi asosiy parametri pik maydoni (S) hisoblanadi.
Biroq, har doim ham tepalik joylarini aniq aniqlash mumkin emas
(masalan, komponentlar to'liq ajratilmaganda). Shuning uchun
xromatogrammaning miqdoriy talqinida cho'qqilarning maydonlari
o'rniga maydonga mutanosib qiymatlardan ham foydalanish mumkin.
Xromatogrammalarni miqdoriy talqin qilishda qaysi parametrga ustunlik
berish har bir alohida holatda hal qilinadi. Tepalik joylarini aniqlashning
bir necha usullari mavjud. Tepalik maydoni uchburchak formulasi
bo'yicha integratorlar yordamida planimetrik tarzda hisoblanadi,
shuningdek, cho'qqilarni keyingi tortish bilan bir hil qog'ozga o'tkazish
mumkin.
Soddalashtirilgan usul cho'qqining balandligini (h) balandligining
yarmiga teng masofada (w0,5) o'lchangan kengligi bilan ko'paytirishdir.
Bu usul juda keng tarqalgan va juda aniq. Nosimmetrik cho'qqilarni olish
va moddalarni to'liq ajratish sharti bilan uni ishlatish mumkin.
Miqdoriy tahlilning uchta asosiy usuli mavjud: mutlaq kalibrlash usuli,
ichki normalizatsiya usuli va ichki standart usuli.
Absolyut bitiruv usuli
21

---

Mutlaq kalibrlash usuli ko'pincha detektorning chiziqli ishlashiga shubha
tug'ilganda va aniqlanayotgan aralashmaning barcha tarkibiy qismlarini
emas, balki faqat bitta yoki ikkitasini aniqlash kerak bo'lganda, masalan,
aralashmalarni tahlil qilishda qo'llaniladi. Ushbu usul yordamida ma'lum
miqdordagi ma'lum birikmaning xromatogrammalari olinadi va kalibrlash
grafigi tuziladi (7-rasm), uning o'qlaridan birida cho'qqilarning
balandliklari (yoki maydonlari) chiziladi, ikkinchisida - AOK qilingan
moddaning miqdori (q). Keyin noma'lum tarkibli aralashmaning aniq
miqdori xromatografik ustunga beriladi, aniqlangan komponentning
cho'qqisining balandligi (yoki maydoni) o'lchanadi va uning miqdori (qi)
kalibrlash egri chizig'idan hisoblanadi.
Guruch. 7. Kalibrlash egri chizig'i
Agar 10-rasmdagi bog'liqlik chiziqli bo'lsa, unda siz qiyalik K (kalibrlash
koeffitsienti) ni hisoblashingiz va formuladan foydalanib namunadagi
i-moddaning (%) tarkibini aniqlashingiz mumkin:
bu erda Wi - aniqlangan komponentning massa ulushi,%; qi - namuna
hajmi, mkl yoki mkg; Ki - kalibrlash koeffitsienti; hi(si) - tepalik balandligi
(maydoni), mm (mm2).
Mutlaq kalibrlash usulini amalga oshirishning zaruriy sharti qat'iy bir xil
kalibrlash va o'lchash shartlariga rioya qilishdir. Eng muhim omillar
namunani dozalashning aniqligi va takrorlanishidir. Xromatografiya
shartlari (jumladan, detektorning ishlashi va natijalarni qayta ishlash) bir
xil bo'lishi kerak.
Ichki normalizatsiya usuli
Ideallashtirilgan holatni tasavvur qiling: xromatogramma tahlil qilingan
namunada mavjud bo'lgan uchta komponentni (A, B, C) ko'rsatadi.
Guruch. 8. Xromatogramma
Detektor signali butun konsentratsiya oralig'ida chiziqli va detektorning
sezgirligi barcha namuna komponentlari uchun bir xil.
Oddiy normallashtirish usulida barcha SA + SB + SC cho'qqilari
maydonlarining yig'indisi 100% deb olinadi, keyin bitta cho'qqi
22

---

maydonining maydonlar yig'indisiga nisbati 100% ga ko'paytiriladi,
massa ulushini xarakterlaydi
bu erda WA, WW, WC mos ravishda A, B, C komponentlarining massa
ulushlari, foizlarda.
Bu usul bir xil miqdorda olingan moddalar tuzilishidan qat'iy nazar bir xil
cho'qqi maydonini beradi degan taxminga asoslanadi. Agar moddalar
kimyoviy jihatdan o'xshash bo'lsa va tashuvchi gaz sifatida yuqori
issiqlik o'tkazuvchanligiga ega bo'lgan gaz (vodorod yoki geliy)
ishlatilsa, bu taxminan bajariladi. Oddiy normalizatsiya usuli ajratilishi
kerak bo'lgan aralashmaning tarkibiy qismlariga nisbatan turli xil
detektor sezgirligida aniq natijalarni bermaydi.
A, B, C moddalarining tahlil qilingan aralashmasining tarkibiy qismlariga
nisbatan detektorning sezgirligidagi farqni hisobga olgan holda,
kalibrlash koeffitsientlari bilan normalizatsiya usuli asoslanadi va
shuning uchun u avvalgisiga qaraganda ancha ishonchli. Bunday holda,
hisoblash quyidagi formula bo'yicha amalga oshiriladi:
dori gazining xromatografiyasi
Bu erda Ki - i-komponentning kalibrlash koeffitsienti, u eksperimental
ravishda aniqlanadi yoki adabiyot ma'lumotlaridan foydalaniladi.
Masalan, A komponentining foizdagi massa ulushi quyidagi formula
bilan hisoblanadi:
Kalibrlash omillari har bir komponent uchun detektor sezgirligidagi farqni
hisobga olish uchun aniqlanadi. Kalibrlash kalibrlash koeffitsienti 1 ga
teng bo'lgan i-komponent va standartdan tashkil topgan ikkilik
aralashmaning xromatografiyasi natijalariga ko'ra amalga oshiriladi.
Kalibrlash koeffitsientlari quyidagi formula bo'yicha hisoblanadi:
Odatda, adabiyotda tuzatish koeffitsientlari (Kn) deb ataladigan, ya'ni
standart (Kst) sifatida tanlangan moddaning kalibrlash koeffitsienti bilan
bog'liq bo'lgan xromatografiya qilingan moddalarning kalibrlash Ki
koeffitsienti keltirilgan:
23

---

Tuzatish koeffitsientlari, kalibrlash koeffitsientlaridan farqli o'laroq, tajriba
shartlariga juda bog'liq emas, lekin ishlatiladigan detektorlarning
turlariga bog'liq.
Ichki normalizatsiya usuli aralashmaning barcha tarkibiy qismlarini to'liq
ajratish va aniqlashni, istisnosiz barcha tahlil qilinadigan moddalar
uchun kalibrlash koeffitsientlarini bilish zarurligini talab qiladi. Har
qanday komponentning eng yuqori parametrini yoki kalibrlash omilini
aniqlashdagi xatolar butun tahlilning noto'g'ri natijalariga olib keladi.
Shuning uchun ichki normalizatsiya usuli asosan kichik komponentli
aralashmalarni muntazam tahlil qilish uchun ishlatiladi.
Ichki standart usuli
Ushbu usul nisbiy yoki bilvosita kalibrlash deb nomlanadi va tahlil
qilinayotgan aralashmaga tahlil qilinayotgan namunaning bir qismi
bo'lmagan va xromatogrammada alohida qayd etilgan oxirgi cho'qqini
beradigan standart moddaning aniq ma'lum miqdorini kiritishga
asoslangan. Standart modda sifatida quyidagi talablarga javob
beradigan modda tanlanadi:
Xromatogrammada cho'qqilarning qolgan qismidan yaxshi ajratilgan
cho'qqi sifatida ko'rinishi kerak; uning cho'qqisi xromatogrammada
qiziqish uyg'otadigan moddalardan uzoqda bo'lishi kerak;
tekshirilayotgan
komponentning
kontsentratsiyasiga
yaqin
konsentratsiyaga ega bo'lishi;
o'rganilayotgan komponentning tuzilishiga yaqin tuzilishga ega bo'lishi.
Shunday qilib, dori vositalaridagi etanol aralashmalarining foizini
aniqlashda ko'pincha ichki standart sifatida izopropanol, geksanol va
boshqalar qo'llaniladi.
Ichki standart usul, agar ko'p komponentli aralashmani tahlil qilishda bir
yoki ikkita komponentning tarkibini aniqlash kerak bo'lsa (barcha
tepaliklarning maydonlarini hisoblamaslik uchun) qo'llaniladi.
Birinchidan, analit va standartning og'irlik nisbati ma'lum bo'lgan
maxsus tayyorlangan aralashmalar ichki standart usuli yordamida
24

---

xromatografiya qilinadi va tepalik joylari o'lchanadi. Keyin, eng yuqori
maydon nisbatining og'irlik qiymatiga bog'liqligi chiziladi.
Komponent
va
aralashmadagi
standart
nisbati
(9-rasm).
Xromatografiyadan so'ng tahlil qilinadigan komponent (Si) va standart
moddaning (Sst) eng yuqori joylari o'lchanadi.
Tahlil qilinayotgan Wi(%) komponentining massa ulushi quyidagi formula
bilan hisoblanadi:
bu yerda r - aralashmadagi ichki etalon massasining tahlil qilinadigan
moddaning massasiga nisbati
Ki, KCT, Si, SCT - kalibrlash koeffitsientlari, tahlil qilinadigan komponent
va standart moddaning maydonlari.
Ushbu usulning asosiy kamchiligi qiziqishning mohiyatini aniqlashga
xalaqit bermaydigan standartni tanlashda qiyinchilikdir. Ichki standart
usul yaxshi takrorlanuvchanlikka, yuqori aniqlikka ega, u detektorning
sezgirlik koeffitsientini bilishni talab qilmaydi, chunki sezgirlikning har
qanday o'zgarishi maydon nisbatiga ta'sir qilmaydi.