Учебно-методическое пособие по биологической химии часть 2 Обмен белков, обмен липидов, биохимия крови, печени, мочи, слюны

Порядок выполнения работы: 
В пробирку налить 20-30 капель концентрированной азотной кислоты с 
хлористым натрием, туда же осторожно по стенке слегка наклоненной 
пробирки наслоить из пипетки профильтрованную мочу. 
Моча благодаря меньшему удельному весу, наслаивается на кислоту. 
На границе раздела жидкостей при наличии белка появляется белое колеч-
ко, толщина и быстрота появления которого зависит от количества белка. 
Экспериментально установлено, что растворы, содержащие 0,033 г/л 
белка, дают мутное белое колечко в конце 2-й, начале 3-й минуты после 
наслаивания. 

---

83 
Если колечко появилось непосредственно после наслаивания мочи, то 
повторяют эту реакцию с мочой, предварительно сделав разведение. Путем 
последовательного разведения мочи и наслаивания ее на азотную кислоту 
достигают такого максимального разведения мочи, при котором кольцо 
появляется между 2-й и 3-й минутой. Это соответствует наличию 0,033 г/л 
белка. Умножая эту цифру на разведение мочи, получают содержание белка 
в моче. 
Например, колечко появилось через 2 минуты, когда моча была разведе-
на в 30 раз, следовательно, белка содержится 0,033 • 30 = 0,99 г/л. 
Данные оформить в виде протокола. 
 

---

84 
Б
2
. Количественное определение белка в моче пробой с 
сульфосалициловой кислотой 
Принцип основан на способности сульфосалициловой кислоты осаж-
дать белок в низких концентрациях с образованием суспензии, вызываю-
щей помутнение раствора. 
Порядок выполнения работы: 
Мочу профильтровать через воронку с бумажным фильтром, индикатор-
ной бумагой проверить рН. Если реакция среды щелочная, подкислить со-
ляной или уксусной кислотой. 
При заведомо высокой концентрации белка (качественное открытие) 
мочу предварительно развести в 2-10 раз. 
В 2 чистые пробирки (опытная и контрольная) налить по 1 мл подготов-
ленной мочи. В опытную пробирку добавить 3 мл 3% раствора сульфосали-
циловой кислоты, а в контрольную – 3 мл изотонического раствора хлорида 
натрия. 
Обе пробирки оставить при комнатной температуре на 5 минут (идет 
реакция осаждения) и проколориметрировать содержимое опытной про-
бирки на ФЭКе при рабочей длине кюветы 5 мм при красном светофильтре 
против контрольной. 
По калибровочной таблице определить содержание белка в исследуе-
мой моче. Если моча была предварительно разведена, полученные данные 
умножить на разведение. 
Полученные результаты оформить в виде протокола, сделать вывод. 

---

85 
Таблица для определения белка с сульфосалициловой кислотой (N – в моче 
белок отсутствует)