Академии наук т. П. Побежимова, А. В. Колесниченко, О. И. Грабельных

Раствор А - 2%Na
2
CO
3
, растворенный в 0,1N NaOH. 
Раствор B - готовят заранее, работают 1% CuSO
4
*5H
2
O и 2% 
тартрат KNa. Затем их сливают одновременно в одну ёмкость. 
Оставляют до образования осадка (хранят в тёмном месте до 
полугода). 
Раствор C – смешивают 50 мл раствора А с 1 мл раствора B. 
Раствор готовят ежедневно. 
Раствор D – коммерческий реактив Фолина – Чокальтеу, 
предварительно разведенный бидистиллированной водой в 
соотношении 1:1. Раствор готовят ежедневно. 
Ход определения. Отбирают 10 мкл митохондриальной 
суспензии. Помещают в пластиковые пробирки, где пробу 
растворяют в 2 мл 0,2 N раствора NaOH в течение 30-60 минут. 
Пробы необходимо тщательно перемешать для предотвращения 
прилипания белка к стенкам пробирки. Из каждой пробы в 
стеклянные 
пробирки 
отбирают 
определенное 
количество 
растворенного белка (0,2 мл пробы + 0,2 мл бидистиллированной 

---

48 
воды или 0,4 мл пробы) в трёхкратной повторности. Контролем 
служит пробирка с 0,4 мл бидистиллированной воды. В каждую 
пробирку приливают по 2 мл раствора С. Тщательно 
перемешивают и оставляют на 10 минут. Через 10 минут добавляют 
по 0,2 мл раствора D, тщательно перемешивают и оставляют в 
темноте на 30 минут для развития окраски. 
По истечению указанного времени у исследуемых образцов 
определяют оптическую плотность на спектрофотометре при 
следующих условиях: длина волны 750 нм, чувствительность 10. 
Вычисляют среднее значение оптической плотности для каждой 
пробы. Количество белка в образцах определяют при помощи 
калибровочной кривой. В качестве стандартного раствора 
используют БСА (выбирают диапазон концентраций от 10 до 100 
мкг).