Dnk sekvensiyasi usullari

RNK ketma-ketliginukleotidlar ketma-ketligining eng qadimgi shakllaridan biri edi. RNK ketma-ketligining asosiy belgisi 1972 va 1976yillarda Gentuniversitetida(Gent,Belgiya)Valter Fiersva uning hamkasblari tomonidan aniqlangan va nashr etilganBakteriofag MS2ning birinchi toʻliq genining ketmaketligi va toʻliqgenomidir. An'anaviy RNK sekvensiyasi usullari ketma-ket bo'lishi kerak bo'lgancDNKmolekulasini yaratishni talab qiladi .

DNK sekvensiyasi usullari

DNK ketma-ketligini aniqlashning birinchi usuli 1970- yildaKornel universitetidaRey Vutomonidan oʻrnatilgan joylashuvga xos primer kengaytma strategiyasini oʻz ichiga olgan. DNK polimeraza katalizi va oʻziga xos nukleotid yorligʻi, har ikkisi ham joriy ketma-ketlik sxemalarida muhim oʻrin tutadi, ketmaketlik uchun foydalanilgan. lambda fag DNKsining birikuvchi uchlari. 1970-1973 yillar orasida Vu, R Padmanabhan va uning hamkasblari bu usuldan har qanday DNK ketma-ketligini sintetik joylashuvga xos primerlar yordamida aniqlashda foydalanish mumkinligini ko'rsatdi.Frederik Sangerkeyin yana tez DNK ketmaketliklar usullarini ishlab chiqish, bu primer-kengaytirish strategiyasini qabulMusnad markazi,Kembrij, Buyuk Britaniya va 1977 yilda "zanjir-bekor ingibitorlari bilan DNK tartibida" uchun bir usul bilan chopValter GilbertvaAllan MaksamdaGarvardham sekvensiyalash usullarini ishlab chiqdi, jumladan, "kimyoviy parchalanish orqali DNKni ketma-ketlashtirish" uchun. 1973-yilda Gilbert va Maxam 24 ta tayanch juftlik ketma-ketligi haqida maʼlum qildilar. Sekvensiyadagi yutuqlargarekombinant DNKningbir vaqtda rivojlanishi yordam berdi. DNK namunalarini viruslardan boshqa manbalardan ajratib olish imkonini beruvchi texnologiya.

Genom sekvensiya

Birinchi toʻliq DNK genomi 1977-yildaphX174 bakteriofagigategishliboʻlgan.Tibbiy tadqiqot kengashiolimlari 1984 - yildaEpshteyn-Barr virusiningtoʻliq DNK ketma-ketligini hal qilib , unda 172 282 nukleotid borligini aniqlashgan. Ketma-ketlikning tugallanishi DNK ketma-ketligida muhim burilish nuqtasi bo'ldi, chunki bu virusning genetik profili haqida oldindan ma'lumotga ega bo'lmagan holda erishildi. 1980-yillarning boshlarida Gerbert Pohl va uning hamkasblari tomonidanelektroforezpaytida ketma-ketlik reaktsiyasi aralashmalarining DNK molekulalarini immobilizatsiya qiluvchi matritsaga o'tkazishning radioaktiv bo'lmagan usuli ishlab chiqilgan.GATC Biotechkompaniyasitomonidan "To'g'ridan-to'g'ri Blotting-