Методические указания по выполнению лабораторных работ Направление подготовки

Оборудование и биологические объекты 
1. Исследуемая вода. 
2. Питательные среды для микроорганизмов и физиологический раствор. 
3. Стеклянная посуда. 
4. Дозаторы объёмом 0,1-1 мл и 1-5 мл. 
5. Термостат на 37 ºС. 
6. Водяная баня. 
7. Газовые горелки. 
8. Спирт, вата, маркер, пинцет, штатив для пробирок. 

---

6 
ВТОРОЙ ДЕНЬ ПРОВЕДЕНИЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО 
ИССЛЕДОВАНИЯ ПИТЬЕВОЙ ВОДЫ 
Принцип метода. Изучают рост микроорганизмов на питательных средах и пересевают 
их на новые питательные среды. 
Ход анализа. 
1. Распределиться на две группы. Каждой группе выбрать чашки Петри, флаконы и 
пробирки с посевами, сделанными на прошлом занятии. 
2. Учесть рост микроорганизмов на питательных средах. 
А. Определение КМАФАнМ в 1 мл воды (2-й день). 
На чашках Петри с МПА подсчитать количество выросших микробных 
колоний. Учитывать колонии, выросшие на поверхности и в глубине МПА. Чтобы 
узнать количество бактерий в 1 мл воды результаты подсчётов необходимо 
умножить на степень разведения воды. От значений КМАФАнМ, полученных 
в результате исследования 1 мл и 0,1 мл воды, находят среднее арифметическое, 
которое и будет являться величиной КМАФАнМ для данного источника питьевой 
воды. Полученные величины КМАФАнМ, заносятся в тетрадь обеими группами. 
Б. Определение БГКП в 1 мл воды (2-й день). 
В положительном случае во флаконах с лактозо-пептонной (глюкозо-
пептонной) питательной средой наблюдается помутнение, выделение газа или 
изменение окраски. Если в лактозо-пептонной (глюкозо-пептонной) питательной 
сред не наблюдаются ни одного из характерных изменений, то можно сделать 
заключение об отсутствии в исследуемых пробах воды БГКП. 
3. Провести пересев микроорганизмов на новые питательные среды. 
Из флаконов и пробирки с лактозо-пептонной (глюкозо-пептонной) 
питательной средой, в которых наблюдается помутнение, выделение газа или 
изменение окраски, при помощи бактериологической петли провести рассев 
содержимого на 3-4-х секторах чашки Петри со средой Эндо. Посевы 
инкубировать при 37 ºС сутки. 
Пересев на среду Эндо необходимо провести, чтобы убедиться, 
что на лактозо-пептонной (глюкозо-пептонной) питательной среде выросли 
БГКП. 
Среда Эндо является дифференциально-диагностической и слабо селективной 
для кишечной микрофлоры (содержит сахар – лактозу; индикаторный комплекс 
c селективными 
свойствами: фуксин основной + сернистокислый натрий 
(Na
2
SO
3
)). Среда имеет бледно-розовый цвет. Бактерии, разлагающие лактозу 
(лактозо-положительные) на данной среде образуют красные колонии, 
а не разлагающие (лактозоотрицательные) – бесцветные. БГКП относятся 
к лактозоположительным бактериям. 
Если в лактозо-пептонной (глюкозо-пептонной) питательной сред 
не наблюдаются ни одного из характерных изменений, то можно сделать 
заключение об отсутствии в исследуемых пробах воды БГКП.