Методические указания по выполнению лабораторных работ Направление подготовки

Оборудование и биологические объекты 
1. Посевы от прошлого занятия. 
2. Питательные среды для микроорганизмов. 

---

7 
3. Бактериологические петли 
4. Термостат на 37 ºС. 
5. Газовые горелки. 
6. Маркер. 
ТРЕТИЙ ДЕНЬ ПРОВЕДЕНИЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО 
ИССЛЕДОВАНИЯ ПИТЬЕВОЙ ВОДЫ 
Принцип метода. Изучают рост микроорганизмов на питательных средах. 
Ход анализа. 
1. Распределиться на две группы. Каждой группе выбрать чашки Петри с посевами, 
сделанными на прошлом занятии. 
2. Определить 
принадлежность 
выросших 
микробных 
культур 
к 
БГКП 
по культуральным, морфологическим и биохимическим признакам. 
А. Для определения культуральных признаков необходимо изучить микробные 
колонии. 
Для БГКП характерны среднего размера, круглые, выпуклые, гладкие, тёмно-
красные, с металлическим блеском (или без него) и ровными краями колонии. 
Однако возможно наличие лактозонегативных БГКП, которые образуют 
розовые и бесцветные колонии, поэтому при исследо-вании питьевой воды 
подвергаются микроскопии и тестированию на оксидазную активность колонии 
с любым типом окраски. 
Отсутствие на среде Эндо роста бактерий или наличие плёнчатых, губчатых, 
с неровными краями и поверхностью колоний позволяет дать заключение 
об отсутствии БГКП в пробах. 
Б. Для определения морфологических признаков провести микроскопию микробов 
с окраской по методу Грама. 
БГКП грамотрицательные, мелкие палочки, не образующие спор. Наличие 
в мазках только грамположительных бактерий говорит об отсутствии БГКП. 
В. Для определения биохимических признаков поставить реакцию на отсутствие 
у микробов оксидазной активности, а также способности разлагать глюкозу. 
Тест на оксидазную активность ставится в чашке Петри на фильтровальной 
бумажке, пропитанной непосредственно перед индентификацией микробной 
культуры специальным реактивом (нафтол + диметилпарафенилендиамин). 
Бактериологической петлёй необходимо взять подозрительную микробную 
колонию и растереть её на фильтровальной бумаге, смоченной реактивом. 
При наличии оксидазы на месте нанесения микроорганизма в течение 1 минуты 
появляется синее окрашивание. 
БГКП оксидазы не образуют, т.е. бумага цвета не изменяет. Наличие 
оксидазоположительных бактерий свидетельствует об отсутствии БГКП. 
Тест на разложение глюкозы проводится посевом микробной колонии уколом 
в полужидкую среду с индикатором ВР и глюкозой. Инкубируют посевы при 
37 ºС 2 суток. Первичный учёт можно проводить через 4 часа. Разложение 
глюкозы БГКП сопровождается выделением углекислого газа и изменением цвета 
среды с синего на жёлтый. При отсутствии хотя бы одного из данных признаков 
говорят о отрицительном результате теста на наличие БГКП. 

---

8