Методичка Гематология

Окраска мазков
Оборудование: контейнеры для окраски мазков с кюветами или «рельсы» 
стеклянные с эмалированными лотками; пинцет; цилиндры или стаканы 
градуированные; палочки стеклянные; стаканчики химические; бутылки с 
притертыми пробками.
В строго нейтральной среде структурные элементы клеток крови в 
азур-эозиновой смеси окрашиваются в различные цвета: щелочные 
компоненты клетки (цитоплазма) — эозином в розово-красный цвет; кислые 
(РНК в ядрышках и цитоплазме, ДНК в ядре) — основными красителями в 
голубовато-синие цвета. Для приготовления красителей и смывания их с 
мазков используют воду нейтральной реакции. Вода кислой реакции 
ослабляет действие щелочного элемента красителя (азура II), вследствие чего 
лейкоциты плохо окрашиваются. Мазки имеют красный цвет за счет красной 
окраски эритроцитов и ядер лейкоцитов. Вода щелочной реакции ослабляет 
действие кислого компонента красителя (эозина), поэтому эритроциты 

---

40 
окрашиваются в серовато-синий цвет, а ядра лейкоцитов — в очень темные 
цвета. Для подщелачивания и доведения реакции воды до нейтральной к ней 
по каплям прибавляют 1%-ный раствор натрия двууглекислого. Щелочную 
воду нейтрализуют 1% раствором уксусной кислоты. Можно брать 
дистиллированную и водопроводную воду в различных сочетаниях.
Реакцию воды можно определить с помощью рН-метра или гематоксилина. 
При использовании гематоксилина к 10 мл дистиллированной воды 
прибавляют 2—3 капли свежеприготовленного спиртового раствора 
гематоксилина. Вода нейтральной реакции окрашивается в бледно-
фиолетовый цвет не ранее чем через 1 мин и не позднее чем через 5 мин. 
Если вода окрасилась раньше чем через 1 мин, значит она щелочная, а если 
позднее чем через 5 мин — кислая.
 
Окраска по Нохту. 
 Реактивы:
- основные растворы красителей — азур II, 1 г/л (1,0 г азура II 
растворяют в 1000 мл дистиллированной воды) и эозин калия; 
- г/л (1,0 г эозина калия растворяют в 1000 мл дистиллированной воды). 
Растворы готовы к употреблению через 14 дней со дня приготовления, 
хранят их в посуде темного стекла с притертой пробкой при комнатной 
температуре; 
- фосфатный буфер или смесь Вейзе (pH 7,4—7,5): калия фосфат 
однозамещенный безводный (КН2Р04) 0,49 г, натрия фосфат 
двузамещенный 0,909г, дистиллированная вода 1000 мл. 
Рабочий раствор готовят перед употреблением, смешивая 25 мл 
основного раствора азура II, 20 мл основного раствора эозина калия и 55 
мл буферного раствора.
Пропорции красителей могут несколько варьировать и должны быть 
установлены опытным путем, при приготовлении свежей порции основных 
растворов красителей. Фиксированные сухие мазки помещают в контейнер, 
который опускают в кювету с рабочим раствором красителя и выдерживают 

---

41 
в нем строго определенное время, подобранное для каждой партии краски, 
— от 20 до 45 мин. Затем контейнер переносят в кювету с водопроводной 
водой. После этого мазки ставят вертикально в штатив для сушки. При 
отсутствии штатива-контейнера высушенные мазки можно красить на 
«рельсах», заливая мазок рабочим раствором красителя возможно более 
высоким слоем (2—3 мл на мазок).