Министерство здравоохранения республики коми санкт-петербургский первый государственный

ПЛОТНОСТЬ СУБПОПУЛЯЦИИ CD68+ КЛЕТОК МИКРОГЛИИ 
НЕОКОРТЕКСА У КРЫС ПОСЛЕ ИШЕМИЧЕСКОГО 
ПОСТКОНДИЦИОНИРОВАНИЯ ГОЛОВНОГО МОЗГА 
Щербак Н.С., Юкина Г.Ю. 
ФГБОУВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский 
университет имени академика И.П. Павлова», Санкт-Петербург, Россия 
Ишемическое посткондиционирование (ИПостК) перспективный 
способ нейропротекции, потенциал которого огромен для применения в 
клинической практике, в спортивной и военной медицине. К настоящему 
времени доказан цитопротективый эффект для нейронов отдельных областей 
головного мозга при применении разработанных протоколов ИПостК при 
экспериментальной церебральной ишемии. При этом влияние ИПостК на 
ненейрональные клетки головного мозга, а также на процесс нейровоспаления 
развивающийся при церебральной ишемии остается до сих пор неизученным. 
Это не позволяет широко и действенно внедрить ИПостК как способ 
нейропротекции в клиническую практику.
CD68 – это гликозилированный гликопротеин, который экспрессируется 
в макрофагах и других мононуклеарных фагоцитах и используется в качестве 
иммуногистохимического маркера для анализа воспаленных тканей. Кроме 
того известно, что белок CD68 способен связывать модифицированные 
липопротеины низкой плотности, фосфатидилсерин и апоптотические клетки. 

---

99 
Цель исследования – изучить влияние ИПостК после глобальной 
ишемии головного мозга на плотность субпопуляции CD68+ клеток 
микроглии неокортекса крыс Wistar в отдаленный реперфузионный период.
Эксперименты выполнены на самцах крыс линии Wistar. Глобальную 
полную 10-минутную ишемию головного мозга у животных моделировали 
наложением микрохирургических зажимов на магистральные артерии, 
отходящие от дуги аорты: плечеголовной ствол, левая подключичная артерия, 
левая общая сонная артерия. ИПостК формировали путем трехкратного 
наложения микрохирургических зажимов на магистральные артерии после 
глобальной ишемии по 15-секунд. Длительность реперфузионного периода 
составляла 168 часов. Экспериментальные группы: «Контроль» - 
ложнооперированные крысы; «Ишемия» – ишемия мозга; «Воздействие» – 
ишемия и ИПостК. Фронтальные срезы головного мозга окрашивали 
гематоксилином и эозином для обзорного исследования препаратов. Для 
морфометрического анализа препараты окрашивали толуидиновым синим по 
методу 
Ниссля. 
В 
качестве 
маркера 
активированных 
клеток 
микроглии/макрофагов в головном мозге использовали белок CD68, который 
выявляли иммуногистохимическим методом, используя первичные мышиные 
моноклональные антитела к антигену CD68. В неокортексе определяли 
количество CD68+ клеток микроглии. 
При гистологическом анализе головного мозга животных группы 
«Контроль» в слоях неокортекса наблюдались единичные морфологически 
измененные нейроны. У всех животных группы «Контроль» в каждом слое 
неокортекса отмечались клетки, экспрессирующие белок CD68. В неокортексе 
животных группы «Ишемия» выживших по окончании 168 часов реперфузии 
после глобальной ишемии было зафиксировано значимое уменьшение числа 
морфологически неизмененных нейронов на 36,8% (Р<0,05) и увеличение 
субпопуляции CD68+ клеток микроглии на 27,8% (Р<0,05) по сравнению с 
аналогичными показателями в группе «Контроль». Применение ИПостК в 
представленном варианте протокола у животных группы «Воздействие» 
приводило к значимому увеличению числа морфологически неизмененных 
нейронов в неокортексе на 22,8% (Р<0,05) и значимому уменьшению 
субпопуляции CD68+ клеток микроглии на 19,8% (Р<0,05) при сравнении с 
таковым в группе «Ишемия».
Таким образом, результаты проведенной работы позволяют 
предположить, что цитопротектиный эффект для нейронов неокортекса крыс 
линии Wistar при применении представленного протокола ИПостК после 
глобальной ишемии головного мозга в отдаленный период реперфузии 
сопровождается, ингибированием субпопуляции CD68+ клеток микроглии, 
что вероятно, предотвращает вторичное повреждение или подавляет апоптоз.

---

100