Н. В. Новоселова физико-химические методы анализа курс лекций

17.5. Высокоэффективная жидкостная хроматография. Хромато-
графирование на колонке – длительный процесс, поскольку продви-
жение через пористый носитель под действием силы тяжести очень 
мало. Для ускорения процесса хроматографирование проводят под 

---

133 
давлением. Такой метод называют высокоэффективной жидкостной 
хроматографией (ВЖХ), он позволил значительно сократить время 
анализа. На рисунке 1 представлена принципиальная схема жидкост-
ного хроматографа с насосом для введения подвижной фазы под дав-
лением. Однако при повышении скорости потока не успевает устанавли-
ваться равновесие между фазами. Скорость установления равновесия кон-
тролируется в основном диффузией веществ, которая в жидкостях проте-
кает очень медленно. 
Чтобы свести к минимуму влияние диффузии и ускорить массооб-
мен, нужно, чтобы гранулы носителя были как можно меньше, а пленка 
нанесенного растворителя как можно тоньше. При этом уменьшаются ко-
эффициенты А и С в уравнении Ван-Деемтера, и тем самым вместо увели-
чения наблюдается уменьшение высоты эквивалентной теоретической та-
релки при повышении скорости потока. 
17.6. Гель-хроматография. Это вид хроматографии, основанный на 
использовании различия в размерах молекул. Его называют также 
гель-фильтрацией или ситовой хроматографией. Неподвижной фазой 
в гель-хроматографии является растворитель, находящийся в порах 
геля, а подвижной – сам растворитель, т.е. и подвижную и неподвиж-
ную фазы составляет одно и то же вещество или одна и та же смесь 
вещества. 
В процессе гель-хроматографирования могут быть отделены 
крупные молекулы, которые гелем не сорбируются, так как их разме-
Рис.1. Схема высоко-
эффективного жидко-
стного хроматографа: 
1–резервуары для рас-
творителей;
2–многоходовой клапан;
3– насос; 4– ввод пробы;
5–термостатированная 
камера; 6- колонка;
7–детектор; 8–самописец 

---

134 
ры превышают размеры пор, от мелких, которые проникают в поры, а 
затем могут быть элюированы. 
Применяемые на практике гели подразделяют на мягкие, полу-
жесткие и жесткие. Мягкими гелями являются высокомолекулярные 
органические соединения с незначительным числом поперечных свя-
зей. Это – сефадексы, агарочные гели, крахмал. Фактор емкости – 3.
Полужесткие гели получают путем полимеризации. Большое распро-
странение получили стирогели. Фактор емкости от 0,8 до 1,2. К жест-
ким гелям относят силикагели и часто пористые стекла, хотя они и не 
являются гелями. Фактор емкости – 0,8…1,1. 
Растворители гель-хроматографии должны растворять все ком-
поненты смеси, смачивать поверхность геля и не адсорбироваться на 
ней. 
Практическое применение гель-хроматографии связано с разде-
лением смеси высокомолекулярных соединений, хотя нередко они 
используются для разделения и низкомолекулярных, так как разде-
ление этим методом возможно при комнатной температуре.