O’zbekiston Respublikasi Oliy ta’lim, Fan va innovattsiyalar Vazirligi Mirzo Ulug’bek nomidagi


Download 53.23 Kb.
bet2/7
Sana17.11.2023
Hajmi53.23 Kb.
#1782271
1   2   3   4   5   6   7
Bog'liq
mikroorganizmlardan oqsil ajratib olsih

2018-03-22 _ Materiallar va usullar
2.1 . Kimyoviy moddalar
Barcha kimyoviy moddalar Sigma Aldrich (Sent-Luis, Missuri, AQSh), Merck (Darmshtadt, Germaniya) yoki Invitrogen (Karlsbad, CA, AQSh) dan sotib olingan.
2.2 . Mikrozarrachalarni tayyorlash
Ion almashinadigan qatronlar Sigma Aldrichdan sotib olindi. Dowex Marathon A2 jel tipidagi, kuchli asosli, anion almashinadigan qatron bo'lib, polistirol divinilbenzol polimerik matritsasida quvvatlanadi va dimetil etanol ammoniy bilan ishlaydi. Dowex Marathon MSC - bu sulfonik guruhlar bilan ishlaydigan makrog'ovak, kuchli kislotali, kation almashinadigan qatron. Amberlite IRA458 divinilbenzol bilan o'zaro bog'langan akril matritsada qo'llab-quvvatlanadigan va trimetil ammoniy bilan ishlaydigan jel tipidagi, kuchli asosli, anion almashinadigan qatron. Qatronlar 20:1 (h/v) nisbatda 50% etanol va 20:1 (h/v) ikki tomonlama deionizatsiyalangan suv (ddH 2 O ) bilan aralashtirish orqali yuvildi, natriy yoki xlorid shakliga 10:1 (h/v) bilan oldindan shartlangan. ) 2 M NaCl kation va anion almashinuvchilar uchun mos ravishda. Keyin, boncuklar 20: 1 (v / v) ddH 2 O bilan aralashtirib, supernatantning o'tkazuvchanligi 1 mS / sm dan past bo'lguncha va pH neytral bo'lguncha 5 marta yuvildi . So'ngra qatron boncuklar asosiy qattiq fraktsiyaning o'rtacha diametri taxminan 1 mkm bo'lgunga qadar pestle va ohak bilan namlangan . 120 g ddH 2 O da 40 g qatronni maydalash 24 soat davomida motorli pestle va ohak bilan amalga oshirildi . Zarrachalar hajmi Live Cell tizimi (Leica Microsystems, Wetzlar, Germaniya) bilan optik mikroskop yordamida o'lchandi. JMicroVision tasvirni tahlil qilish dasturi (Roduit, N., Jeneva universiteti, Shveytsariya Versiya 1.2.7) yordamida 5000-50 000 diskret optik proyeksiyalarni hisoblash yoʻli bilan zarrachalar hajmining taqsimlanishi ekvivalent aylana diametrdan statistik tarzda baholandi. Er zarralarining shakllari optik proektsiyalarga asoslanib, tartibsiz deb hisoblangan. Mikropartikullarning kontsentratsiyasi ho'l pelletni tortish va uni umumiy suspenziya hajmiga bog'lash orqali aniqlandi. Süspansiyonlar Heraeus Multifuge X3R da TX-750 Swinging Bucket Rotorli (Thermo Fisher Scientific, Vena, Avstriyadan) 2 soat davomida, 4000 × g va 23 ° C da 50 ml naychalarda santrifüjlash orqali o'rnatildi; ho'l granulalar ddH 2 O da qayta suspenziya qilindi.

Download 53.23 Kb.

Do'stlaringiz bilan baham:
1   2   3   4   5   6   7




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling