Учебное пособие Часть II санкт-Петербург 016 ббк 28. К 78
Выявление коагулазоположительных
Download 1.61 Mb. Pdf ko'rish
|
2208 (1)
- Bu sahifa navigatsiya:
- 3.4. Выявление сульфитредуцирующих клостридий
3.3. Выявление коагулазоположительных
стафилококков Из первого разведения колбасных изделий делают посев по методу Дригальского на желточно-солевой агар (ЖСА), содержащий 6,5 % NaCl, для выявления лецитиназной активности коагулазополо- жительных стафилококков. Посевы термостатируют при темпера- туре 37 °С в течение 24 ч. Колонии токсикогенных стафилококков образуют на среде ЖСА «радужный венчик». Из подозрительных ко- лоний готовят мазки и окрашивают их по Граму. Для подтверждения патогенности стафилококков ставят реакцию плазмокоагуляции. Наличие грамположительных стафилококков, давших положи- тельную реакцию плазмокоагуляции и реакцию на лецитиназу, сви- детельствует о присутствии токсикогенных стафилококков. 21 3.4. Выявление сульфитредуцирующих клостридий Сульфитредуцирующие клостридии широко распространены в природе, часто обнаруживаются в кишечнике человека и животных. Некоторые штаммы сульфитредуцирующих клостридий (в частности, Clostridium perfringens) могут вызвать у человека кишечные заболе- вания, характеризующиеся как пищевые токсикоинфекции, механизм действия которых обусловлен наличием у этих микроорганизмов эн- теротоксинов. Clostridium perfringens – грамположительные палочки, распо- лагающиеся поодиночке, попарно или в виде цепочки, неподвижные, in vivo образуют капсулу. Эндоспоры овальные, расположены цен- трально, субтерминально или на конце клетки. На плотных средах формирует S- и R-колонии; S-колонии круглые, гладкие, с ровными краями, в начале роста напоминающие капли росы; R-колонии не- правильной формы, бугристые, с шероховатыми неровными краями, в глубине агара напоминающие комки ваты. Определение этой группы бактерий основано на учете специ- фического роста клостридий в средах, содержащих железа сульфит. При взаимодействии натрия сульфита с железа хлоридом образуется железа сульфат, вызывающий почернение среды (рис. 3.1). Выявление вегетативных клеток сульфитредуцирующих кло- стридий в мясных продуктах включает два этапа: обнаружение сульфитредуцирующей способности микроор- ганизмов; определение принадлежности выделенных микроорганизмов к клостридиям. Сульфитредуцирующую способность микроорганизмов опре- деляют путем посева исследуемого продукта на среду Вильсона– Блера или железосульфитную. Если после инкубации чашек Петри на среде выросли темно-серые или черные колонии, вызвавшие почер- нение среды, их исследуют на принадлежность к клостридиям. Для этого материал из колоний пересевают в пробирки со средой Китта– Тароцци, инкубируют при температуре 37 °С в течение 24–72 ч. При наличии помутнения среды и выделения газа берут культуру со дна пробирки, готовят микроскопические препараты, окрашивают их по Граму и выявляют наличие спор, определяют каталазную активность. Сульфитредуцирующие клостридии не образуют каталазы. 22 Рис. 3.1. Колонии сульфитредуцирующих клостридий на железосульфитной среде Для выявления сульфитредуцирующих клостридий в пробирки, содержащие по 9 см 3 расплавленной и охлажденной до 45 °С среды Вильсона–Блера, вносят по 1 см 3 десятикратных разведений (от 10 –1 до 10 –7 ) взвеси исследуемого продукта. Тщательно перемешивают посевной материал, помещают в термостат и культивируют при тем- пературе 46 °С в течение 8–12 ч или при температуре 37 °С в тече- ние 20 ч. Появление на среде черных колоний или почернение среды свидетельствует о присутствии в исследуемом продукте сульфитре- дуцирующих клостридий. За положительный титр клостридий принимают то максималь- ное количество взвеси, в посеве которой произошло почернение сре- ды. Например, если характерные изменения наблюдаются в пробир- ках с разведением 10 –2 , то считают, что в 1 г исследуемого продукта содержится 1 10 2 микробных клеток. В случае отсутствия роста на элективных средах и при нали- чии роста на средах обогащения посевы из этих сред пересевают в чашки Петри со средой Эндо и инкубируют в термостате с темпера- турой 37 °С в течение 24 ч. В дальнейшем исследование проводят по методике бактериологического исследования мяса. 23 В табл. 3.1. приведены микробиологические показатели кол- басных изделий. Таблица 3.1 Download 1.61 Mb. Do'stlaringiz bilan baham: |
Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling
ma'muriyatiga murojaat qiling