Учебное пособие для самостоятельной подготовки к экзамену по микробиологии, вирусологии и иммунологии

127. Реакция связывания комплемента, методы постановки, механизм и использование ее в вирусологии.
В вирусологии с помощью РСК выявляют антигены вирусов и антитела у больных в целях ранней и ретроспективной (после заболевания) диагностики вирусных инфекций.
При постановке реакции в качестве антигена используют вируссодержащий материал: жидкости эмбриона, зараженного вирусом, взвеси инфицированных тканей животного, зараженного вирусом, экстракты клеток культур ткани вместе с культуральной жидкостью, кровь, спинномозговую жидкость, мочу, испражнения больного человека.
Особенностью постановки РСК является постановка реакции на холоду, когда пробирки с основной реакцией, содержащие сыворотку, антиген и комплемент для взаимодействия выдерживают 18-20 часов при 4°С в холодильнике, после чего добавляют гемолитическую систему и через 45 мин учитывают результат. При постановке РСК для обнаружения прироста антител, также как и при постановке других серологических реакций, используют парные сыворотки.

128. Опсоно-фагоцитарная реакция. Фагоцитарная активность и интенсивность. Практическое применение.
Применяется для олределения опсонинов — антител, стимулирующих фагоцитарную активность лейкоцитов, т.е. серодиагностики инфекций, например, бруцеллёза.
Усиление фагоцитоза происходит за счёт присоединения опсонинов с активными центрами (Рав-фрагмент) к детерминантам бактерий, а затем с помощью Рс-фрагментов к Рс-рецепторам фагоцитов. В нормальной сыворотке содержится небольшое количество опсонинов, которые проявляют свое действие в присутствии комплемента. В иммунной сыворотке опсонинов больше, и их активность в меньшей степени зависит от комплемента.
Компоненты:Исследуемая сыворотка, Нормальная сыворотка, Суточная микробная культура (напр., стафилококковая) Фагоциты — взвесь нейтрофилов
Инкубация при 37 °С в течение 30 минут. Из каждой пробирки готовят мазки, окрашивают по Романовскому-Гимзе и считают под микроскопом количество микробов, в 100 и более нейгрофилах, т.е. определяют фагоцитарный показатель.
Фагоцитарный показатель — количество микробов, поглощенных одним нейтрофилом.
Опсонический индекс фагоцитарный показатель иммунной (исследуемой) сыворотки / фагоцитарный показатель нормальной сыворотки.
Чем выше опсонический индекс (должен быть > 1), тем выше иммунитет.
Опсоно-фагоцитарный индекс — это цифровой показатель = количество фагоцитов х оценка фагоцитоза (в зависимости от количества поглощенных микробов). Максимальный показатель -75.