Volgograd davlat ijtimoiy-pedagogika universiteti

3.2 Geterozigotali tashishni aniqlash usuli

Muayyan kasallik uchun heterozigot holati aniqlangan odam uchun bunday retsessiv genning tashuvchisi bilan turmush qurmaslik juda muhimdir, chunki. ularda kasal bolaga ega bo'lish xavfi birinchi va keyingi homiladorlikda 25% ni tashkil qiladi.

Ayollarning heterozigotligi haqidagi taxminlar:
1) agar ayolning otasi irsiy kasallikka chalingan bo'lsa;
2) agar ayol ikki yoki undan ortiq kasal o'g'il tug'gan bo'lsa;
3) agar ayolning ukasi (akalari) zarar ko'rgan bo'lsa va qo'shimcha ravishda uning o'g'li yoki nabirasi (qizidan) bo'lsa;
4) agar ayolning ikkita qizi bo'lsa va ularning har birining o'g'li (yoki o'g'li) bo'lsa.
Tadqiqot yo'llari:
1. Rivojlanish anomaliyalarini aniqlash bilan kasallikning mikrosimptomlarini klinik o'rganish.
2. Stress testlarini qo'llash (fenilalaninni qabul qilish qonda uning tarkibini ko'paytirishni aniqlaydi - fenilketonuriya uchun heterozigotlik farazi).
3. Qon hujayralari va to'qimalarini mikroskopik tekshirish.
4. Gen mutatsiyasiga ta'sir qilgan ferment faolligini biologik aniqlash.

3.3 Polimeraza zanjiri reaktsiyasi (PCR)

biologik materialda (namunada) nuklein kislotaning (DNK) ma'lum qismlarining kichik kontsentratsiyasini sezilarli darajada oshirishga imkon beradi .

DNKni kuchaytirishga qo'shimcha ravishda, PCR nuklein kislotalar bilan boshqa ko'plab manipulyatsiyalarga imkon beradi (mutatsiyalarni kiritish, DNK bo'laklarini birlashtirish) va biologik va tibbiy amaliyotda keng qo'llaniladi, masalan, kasalliklarni tashxislash (irsiy, yuqumli), otalikni aniqlash, genlarni klonlash, yangi genlarni ajratib olish.

PCR - bu bitta hujayra yordamida bolaning karyotipini aniqlashga imkon beruvchi usullardan biri. PCR texnologiyalari bilan birgalikda diagnostika uchun materialning biopsiyasi urug'lantirilgandan keyin 3-kuni, embrionda 6 dan 10 gacha blastomerlar mavjud bo'lganda amalga oshiriladi. Ushbu bosqichda blastomerlar pluripotent bo'lib, biopsiya jarayoni embrionning hayotiyligiga salbiy ta'sir ko'rsatmaydi. Optimal - 1 - 2 blastomerlarni tahlil qilish. Hozirgi vaqtda blastomer biopsiyasi prenatal diagnostika uchun zamonaviy yondashuv bo'lib, klinik amaliyotda qo'llanilishi mumkin.

Bir hujayrali PCRning samaradorligi an'anaviy PCRga qaraganda ancha past bo'lib, unda DNK shablonining miqdori bir necha barobar ko'p bo'lishi mumkin. Usul samaradorligining pasayishi ham namuna, ham PCR protsedurasining o'zi bilan bog'liq bo'lgan turli sabablar natijasida yuzaga kelishi mumkin. Operatsion muammolar qatoriga hujayrani naychaga o'tkazish paytida materialning yo'qolishi yoki hujayra naychaga joylashtirilgunga qadar to'satdan liziz kiradi, bu esa kuchaytirilish samaradorligini pasaytiradi yoki uning yo'qligiga olib keladi. Ichki omillar - yadroning yo'qligi, DNKning yo'qolishi yoki degradatsiyasi bilan hujayraning degeneratsiyasi. Bu omillarni nazorat qilish ancha qiyin. PCR samaradorligi, yuqori sifatli yadroli hujayrani o'tkazish tartibiga qo'shimcha ravishda, DNK shablonini olish uchun hujayraning sifatli lizisiga ham ta'sir qiladi.