Академии наук т. П. Побежимова, А. В. Колесниченко, О. И. Грабельных

3.3 
Рокет-иммуноэлектрофорез. 
Рокет- иммуноэлектрофорез проводят в агарозе по Лореллу 
(Остерман, 1983). Иммуноэлектрофорез проводят на стеклянных 
пластинках размером 4.5 х 12 см . На пластинки наслаивают слой 
расплава 1%-ного раствора агарозы, приготовленного на 0.025 М 
ацетат-барбиталовом буфере с рН 8.9, термостатированного при 
45
0
С и смешанного с антителами. На крае стекла, обращенном к 
катоду, пробойником просекают цилиндрические лунки для 
образцов. Стекло со слоем геля на нем помещают на горизонтально 
расположенный столик прибора для электрофореза в агарозе и 
припаивают расплавом 1%-ного раствора агарозы к агарозным 
столбикам, находящимся в катодном и анодном отсеках прибора 
для электрофореза. В качестве электродного также используют 
0.025 М ацетат-барбиталовый буфер с pH 8.9. В лунки вносят 
рассчитанные объемы раствора белкового препарата, выровненные 

---

82 
по содержанию белка, и электрофорез проводят в холодной комнате 
при температуре 4
0
С и напряжении 3-4 V/см в течение 20 часов. 
Препараты отмывают 0.15 М водным раствором NaCl в 
течение пяти-семи суток с ежедневной сменой отмывающего 
раствора и высушивают. Окрашивают препараты водным 
раствором, содержащим 0.1% Кумасси R-250, 10% этилового спирта 
и 7% уксусной кислоты. Отмывка препаратов производится водным 
раствором, содержащим 25% этилового спирта и 7% уксусной . 
кислоты до обесцвечивания фона (Рис. 21). 
Рис. 21. Рокет-иммуноэлектрофорез 
Этот метод позволяет, при наличии "узкой" или 
моноклональной 
сыворотки 
одновременно 
определять 
относительное содержание антигена в большом количестве 

---

83 
белковых 
препаратов. 
Расчет 
относительного 
изменения 
содержания антигена проводят, используя для построения 
калибровочной кривой ряд разведений белкового препарата, 
используемого в качестве контроля (Остерман, 1983).