Академии наук т. П. Побежимова, А. В. Колесниченко, О. И. Грабельных

3 
Иммуноэлектрофоретические методы 
Сущность метода иммунохимии. 
Иммунохимический метод анализа белков основан на 
реакции специфического взаимодействия антиген-антитело. В этой 
реакции проявляется одна из элементарных биологических функций 
макромолекулы 
белка - способность 
к 
специфическому 
взаимодействию 
по 
принципу 
"узнавания". 
При 
этом 
чувствительность метода такова, что для выявления различий 
между двумя белками достаточно минимальной разницы в 
первичной структуре полипептида: например, замены или 
перестановки 
лишь 
одной 
аминокислоты 
в 
антигенной 
детерминанте.
Специфичность 
и 
высокая 
чувствительность 
иммунохимической реакции позволяет использовать ее в анализе 
ничтожно малых количеств белка - антигена. Хорошими 
иммунными сыворотками можно обнаружить в одном мл жидкости 
всего 1 мкг, а в некоторых случаях - 0.1 мкг белка (Конарев, 1983). 
 
Взаимодействие антигенов и антител. 
Взаимодействие антитела с антигеном представляет собой 
кооперативный процесс, в котором наряду с соответствием друг 
другу активного центра и антигенной детерминанты такое же 

---

77 
важное значение имеет общая конформация их носителей, то есть 
макромолекул иммуноглобулина и белка - антигена. 
Основные типы молекул иммуноглобулинов, в том числе и 
кроличьих, имеют по два активных центра, то есть являются 
двухвалентными. Они могут присоединять две молекулы антигена с 
одной детерминантной группой. Комплексы таких размеров обычно 
растворимы. Если антиген имеет две детерминантные группы, 
может образоваться длинная цепь: ...-Аг-Ат-Аг-Ат-Аг-... Если 
антиген имеет три детерминантные группы и более, то образуются 
разветвленные цепи, решетчатые структуры. 
Полимеры такого типа нерастворимы, и реакция антиген-
антитело сопровождается выпадением осадка, или преципитата. 
При большом избытке антигена преципитаты растворяются. Это 
происходит благодаря тому, что свободные молекулы антигена 
конкурируют за молекулы антител, в результате чего нерастворимая 
решетка распадается на мелкие растворимые комплексы типа Аг-
Ат-Аг (Остерман, 1983). 
Среди 
иммунных 
сывороток, 
используемых 
в 
иммунохимических анализах, наиболее благоприятна по составу 
иммуноглобулинов кроличья. Она содержит наиболее однородные 
по физико-химическим свойствам (а также по N-концевым 
аминокислотам) антитела. К тому же преципитаты с антителами 
кроличьей сыворотки оказались очень слабо растворимыми в 
избытке антигена.