Фармамакологик биокимё

Машғулот N21 Жигарда гликоген миқдорини Зейфтер услубида
аниқлаш.
Гликоген (С
6
Н
10
О
5
)
n
-полисахарид, хайвон организмида углеводларнинг
асосий запас шакли. Организм фаолиятида жигарнинг гликоген ва глюкоза
ҳосил қилиш функцияси алоҳида ўрин тутади. Бунинг асосида бир томондан,
унинг қон таркибидаги глюкозадан гликоген синтез қилиши бўлса, иккинчи
томондан, гликогенни глюкозага парчалаб, организм эхтиёжига =араб, =онга
чи=ариши ётади . Хар хил щайвонларда жигарда гликоген ми=дори 2-8%,
айрим щолатларда эса 15-20% гача етиши мумкин. Патологияда, айни=са
гепатотроп захарлар ва фармакологик препаратлар таьсирида жигарда
гликоген синтезини бузилиши о=
ибатида унинг ми=
дори камайиши
кузатилади. Бунга мисол =илиб Ссl
4
, гелиотрин, фосфор билан хроник
защарланишни келтирса былади.
Ишнинг мощияти
Концентрланган сульфат кислотасида гликоген антрон билан =издирилганда
кык рангли комплекс щосил =илишига асосланган. Рангнинг интенсивлиги
гликоген концнтрациясига бо\ли=.
Жихозлар ФЭК, сув хамоми, центрифуга, 100 мл ылчамли колбалар,
центрифугали ва оддий пробиркалар, щар щил хажмдаги пипеткалар, шиша
таё=чалар.
Реактивлар 1. 5% глюкозани стандартли эритмаси;
2. 30% ыюувчи калий,
3. 96
0
этил спирти
4. Антрон реактиви: концентрланган сульфат кислотасидаги 0,3% антрон
эритмаси (солиштирма 
массаси 1,74) Кырсатилган 
кислота
концентрациясини =уйидагича тайёрланади: 100 мл хажмдаги колбага 20 мл
дистилланган сув =уйилади ва эхтиётлик билан белгигача солиштирма

---

массаси 1,84 былган кимёвий тоза сульфат кислотаси тылдирилади. Антрон
реактиви тажриба ытказиладиган куни тайёрланади.
Ишнинг бажарилиши.
Хайвондан янги олинган жигарни 0,5г 3мл 30% ыюувчи калий са=лаган
пробиркага солинади ва =айнаб турган сув хамомига 20-30 минут гомоген
эритма щолатига келгунча =ыйилади. Сынгра пробиркага 4 мл 96
0
этил
спирти =ышилиб, шиша таё=ча билан яхшилаб аралаштирилади ва сув
щамомида 30-40 секунд давомида =айнагунча ушланади. Пробирка сувда
совитилиб, 15 минут 3000 айланиш тезлигида центрифугаланади.
Пробиркадаги чыкма дистилланган сувда эритилиб, 100мл ли колбага
=уйилади ва яхшилаб аралаштириб , эритма хажмини 100мл етказилади.
Эритмадан 1мл пробиркага олинади, бош=а пробиркага эса 1мл глюкозани
стандарт эритмаси солинади. 2та бош=а пробиркаларга 1мл дан дистилланган
сув =уйилиб, контроль сифатида фойдаланилади.
Хамма пробиркаларга 6мл дан антрон реактиви =ышилиб, аралаштирилади
ва 10 минутга =айнаб турган сув хамомига =ыйилади. Сову= сувда
совитилиб, стандарт ва тажриба намуналари контрольга нисбатан 660 нм 10
мл ли кюветаларда =изил светофильтрда колориметрланади.
Щисоблаш
0,05мг
.
Е тажриба
.
А
.
Б
.
10 (г/кг)
Е стандарт
.
1000 мг
.
1,1
Бу ерда-0,05 мг-1мл стандарт эритмадаги глюкоза ми=дори;
А-гликоген эритилган сувнинг ми=дори;
Б-100г жигар былаги;
1,1-глюкоза ва гликогенни экстинкция нисбати
Нормада оч =олган каламушнинг жигарида гликоген ми=дори 15-20 г/ кг,
ты=ида 40 г/ кг гача. Текшириш натижаларига сульфат кислотасининг
тозалиги ва антрон реактивининг тайёрланган муддати (янги тайёрланган
былиши керак) таьсир =илади.