Фармамакологик биокимё

Ферментлар фаоллигини щисоблаш.
1.
Зардоб учун щисоб. Калибрланган графикдан текширилувчи материални
оптик зичлигига мос келадиган натрий пируватни ми=дори ани=ланади .
Сынгра 1мл =он зардобини 37
0
С-да 1соат давомида инкубация =илиниши
натижасида щосил былган пируватнинг мкмоль да ифодаланган фермент
фаоллиги =уйидаги формула быйича хисобланади.
АсАТ=
а
· 10
АлАТ=
а
· 2 · 10
-бунда
88 88
10-бир мл =он зардобига ытказиш учун щисоблаш коэффиценти.
а- калибрлаш графиги быйича топилган пируватнинг =он зардобидаги
ми=дори, мкг-да
88-
1мкмоль пируватнинг о\ирлиги, мкг-да
2- 1соат давомида инкубация =илинишидаги =айта саналган коэффиценти
Нормада одам =он зардобида фермент фаоллиги АсАТ учун 0,1-0,45 мкмоль,
АлАТ учун 0,1-0,68 мкмоль пируватнинг 1соат давомида 37
0
С да 1мл
сыворткасида щосил былган ми=дори.
2.
Ты=ималар учун хисоблаш . Фермент фаоллиги 1г ты=имани 1соат
давомида 37
0
С да инкубация =илинишидан щосил былган 1мк моль
пируват быйича щисобланади.
АсАТ=
а
· гомогенатни суюлтириш даражаси
88
· ты=има о\ирлиги, г
АлАТ=
2 а
· гомогенатни суюлтириш даражаси
88
· ты=има о\ирлиги, г
(коэффицентлар маьноси ю=орида кырсатилганидек)
Калибрлаш графигини тузиш.
Келтирилган жадвалга биноан
пробиркаларга натрий пируватнинг стандарт эритмаси солинади ва 0,5мл 2,4-
динитрофенилгидразин =ышиб, аралаштирилади. 20 минутдан сынг 0,4н

---

натрий гидроксид эритмасидан 5,0мл =ышилади ва хона щароратида
=
олдирилади . 10 минут ытгач пробиркалардаги эритмалар яшил нур
фильтрида (530нм) 10мм =алинликдаги кюветаларда контрольга нисбатан
(пируват ырнига сув =ыйилади) фотометрланади. Калибрлаш эгри чизи\ини
чизишда ордината ы=ига топилган оптик зичликлар, абцисса ы=ига унга мос
былган пируватни мкг ёки мкмольдаги ми=дори =ыйилади
(бу холда олинган натижалар 10 га кыпайтирилади)
пируват стандарт эритма
1мл =он
зардобини 1 соат
37
0
С инкубация-
сидаги 
пируват
ми=дори
пируват ми=дор
и
дистилл
анган
сув
АсАТ 
АлАТ
пробирка мл
мкг
мк моль мл
1
0,05
4,4
0,05
0,55
0,5
1,0
2
0,10
8,8
0,10
0,50
1,0
2,0
3
0,15
13,2
0,15
0,45
1,5
3,0
4
0,20
17,7
0,20
0,40
2,0
4,0
5
0,25
22,0
0,30
0,35
2,5
5,0
6
0,30
26,4
0,35
0,30
3,0
6,0