Фармамакологик биокимё

Услубнинг асоси. Реакция натижасида щосил былган кетокислоталар-
пируват ва оксалоацетат (оксалоацетат осонлик билан пируватга айланади)
иш=орий мухитда 2,4-фенилгидразин таьсирида пируватни =изил-=ын\ир
рангли 2,4-фенил гидрозонига айланади, рангнинг интенсивлиги пируват
ми=дорига ты\ри пропорциональ.
АлАТ ва АсАТ фаоллиги юрак ва жигар ты=ималари экстрактида =он
зардобида норма ва паталогияда текширилади.
Текшириш материали. Юрак ва жигар ты=ималари гомогенати, янги норма
ва паталогиядаги =он зардоби.
1.
Ты=има гомогенати . 5г юрак ёки жигар ты=имасини (экспериментда
каламуш, =уён органлари) кварц =уми билан чинни ховончада (ёки
гомогенизатор ёрдамида) озро= физиологик эритмада майдаланилади.
Сынгра гомогенат 200мл колбага солиниб, хажми физиологик эритма
билан белгисигача етказилади. Олинган гомогенат бир сутка совутгичда
са=лангандан сынг марли ор=али фильтрланади ва фильтратдан фермент
препарати сифатида фойдаланилади. Мазкур эритмани совутгичда бир
неча кун са=лаш мумкин.
2.
АсАТ фаоллигини ани=лаш учун субстратли эритма 29,2мг
a-кетоглутарат
кислотаси ва 2,66 г ДL-аспарагин кислоталарининг натрий гидроксиди
1моль/л эритмасида эритилади. Натрий гидроксиди асталик билан рН7,4 га
етгунча =ышилади. Сынгра фосфатли буферда рН 7,4 олинган эритма
хажми 100мл га етказилади.
3.
АлАТ фаоллигини ани=лаш учун субстратли эритма 29,2мг
a-кетоглутарат
кислотаси ва 1,78г DL-аланин ю=орида ёзилганидек эритилади. Агарда иш
жараёнида DL аспарат ва аланин ырнига уларнинг L-изомерларидан
фойдаланиладиган былса, кислоталар ми=дори икки баробар кам олинади.

---

4.
Бромтимол кыкининг 0,04% эритмаси. 100мг индикаторни ховончада
3,2мл 0,05моль/л натрий гидроксид эритмаси билан эритилади. Эригандан
кейин, сув билан ювиб, 250мл хажмдаги колбага =уйилиб, хажми
белгисигача сув билан тылдирилади.
5.
2,4-динитрофенилгидразин (2,4-ДНФ) эритмаси. 19,8мг 2,4-ДНФ ни оз
ми=дордаги 1 моль/л хлорид кислота эритмасида сув хаммомида истилган
щолатида эритилади. Совутилиб, хлорид кислота хажмини 100мл га
етказилади. Эритмани бир суткадан сынг фильтрлаб, совутгичда =орамтир
идишда са=лаб, бир йилгача ишлатса былади.
Реактивлар.
1.
фосфатли буфер, 0,1моль/л ни эритма (рН-7,4),
2.
Бромтимол кыки, 0,04%-ли эритмаси,
3.
АсАТ ни ани=лаш учун таркибида
a-кетоглутарат ва аспарат тутган
субстратли эритма
4.
АлАТ ани=
лаш учун таркибида аланин ва
a-кетоглутар кислотаси
са=лаган субстратли эритма
5.
2,4-динитрофенилгидразин (2,4-ДНФ) эритмаси,
6.
натрий гидроксид (NaOH), 4 моль/л эритмаси
7.
таркибида 1мл да/10мкг натрий пируват са=лаган стандарт эритма (бунинг
1мл 88мкг пируватга ты\ри келади)