Фармамакологик биокимё

Ишнинг бажарилиши. Анализ =илиш олдидан тайёрланган гомогенатлар
яна фосфатли буферда (рН-7,4) 10марта суюлтиради.
N1 спектрофотометр кюветасига (назорат) 2,8мл калий фосфат буфери (рН-
7,4), 0,1мл ты=има гомогенати ва 0,1мл НАДФ
.
Н
2
эритмаси солиниб, шу
захоти секундомер босилади, кювета ичидаги шиша таё=ча билан яхшилаб
аралаштирилгач, оптик зичлиги 340нм ылчанади, ылчаш жараёни щар
минутда 5минут давомида =айтарилади.
N2 кюветага 2,6мл калий фосфат буфери, 0,1млты=има гомогенати , 0,1
НАДФ
.
Н
2
эритмаси, 0,2мл оксидланган глутатион солиниб, шу захоти
секундомер босилади, яхшилаб аралаштирилиб, оптик зичлиги ю=орида
назорат намуасида кырсатилганидек ылчанади.
Хисоблаш. Глутатионредуктаза фаоллиги формула быйича (нмоль/ мин.мг)
щисобланади.
А =
Е мин
· 1000
бунда
2,07
· С

---

С-тажриба намунасидаги о=сил ми=дори мг-да , Емин - тажриба ва назорат
намуналарининг оптик зичлиги ызгариш фар=и ; услуб оддий ва осонлик
билан бажарилилади, аммо =ышилаётган реактивларни кетма-кетлиги ва
ани= ва=т орали\ига эьтибор бериш лозим.
Машғулот N34.
Супероксиддисмутаза (СОД) фаоллигини эритроцитларда ани=лаш.
Супероксиддисмутаза (супероксид-оксидоредуктаза 
КФ 1
.
15
.
1
.
1)
супероксиданион-радикаллари ( О
-2
) дисмутация реакциясини катализлаб,
уларни зарарли хусусияти камро= былаган молекуларга (Н
2
О
2
ва О
2
)
айлантиради ва шу йыл билан хужайра функциясини щимоя =илади.
О
2
-
+ О
2
-
+ 2Н
СОД
® Н
2
О
2
+ О
2
Супероксид 
радикаллари 
дегидрогеназалар, аминоксидазалар,
цитохромоксидаза ферментлари иштрокида щосил быладилар. Супероксид
радикалларининг 
концентрациясини 
хужайрада 
ошиши 
мембрана
липидларини перекисли оксидланишини стимуллайди, эритроцитларни
шкастлайди ва ялли\ланиш жараёнларини келтириб чи=аради. Фермент фаол
марказида =андай металл былишига (Сu, Zn, Fe) =араб, СОД ни уч хили
ани=ланган . Эритроцитларда Сu га бо\ли= СОД бор. +уйида келтирилган
услуб С. Чевари ва соавт (1985), Е.Б.Дубинина ва соавт (1983) ишларидан
олинган.
Услуб асоси. Никотинамидаденин-динуклеотидни =айтарилган шакли
(НАДФ
.
Н
2
) билан феназинметасульфатни ызаро аэроб реакцияси
натижасида щосил былган супероксид анионларига СОД-ни тетразол нитро
кыки билан конкуренциясига асосланган. Ушбу реакция о=ибатида тетразол
нитро кыки =айтарилиб тетразолгидразинини щосил =илади. СОД иштрок
этганида тетразол нитро кыкини =айтарилиш фойизи камаяди.