Фармамакологик биокимё

Машғулот N32. +оннинг пероксидаза фаоллигини ани=лаш.
пероксидаза (донор-водород пероксиди-оксидоредуктаза КФ 1
.
11
.
1
.
7) щар-
хил субстратларнинг оксидланишини водород пероксиди хисобига
катализлайди. Бу реакциянинг биринчи этапида пероксидаза-водород
пероксиди комплекси хосил былиб, сынгра субстрат оксидланади.
Пероксидаза
+ Н
2
О
2
® пероксидаза-Н
2
О
2
Пероксидаза -Н
2
О
2
+ субстрат ® пероксидаза + субстрат + 2 Н
2
О
2

---

Организмда щар-хил бирикмалар-феноллар, ароматик аминлар, билирубин
в.б. пероксидаза субстрати былишлари мумкин. Пероксидаза каталаза
сингари таркибида гем са=ловчи ферментлар гурущига киради ва фаол
марказида темир (Fe
++
) атоми бор. Пероксидаза фаоллигини =он таркибида
ани=лаш оксидланиш жараёнларида, айни=са металл билан комплекс щосил
=илувчи биологик моддаларнинг таьсирини ырганишда ахамиятга эга.
Услуб асоси.  +оннинг пероксидазали фаоллигини ани=
лаш асосида
пероксидаза иштирокида водород пероксиди билан оксидланувчи
индигокармин концентрациясини камайиши былиб, унинг ми=
дори
фотометрлаш йыли билан ани=ланади.
Жихозлар. Спектрофотометр ёки ФЭК, сув хаммоми, секундомер,
пробиркалар, пипеткалар.
Реактивлар.
1.Ацетатли буфер, рН-4,9 , 0,2м сирка кислотаси эритмасини 0,2м сирка
кислотасининг натрийли тузи билан 3,5:6,5 нисбатда аралаштириш йыли
билан олинади. 0,2м сирка кислотаси эритмасини тайёрлаш учун 11,2мл
музли сирка кислотасини бир литрли колбага солиб, хажмини дистилланган
сув билан бир литрга етказилади. 0,2м сира кислотаси натрийли тузи
эритмасини тайёрлашда уни 16,4г дистилланган сувда 1л ылчовли колбада
эрититлади.
2.
0,0005м индигокармин эритмасини тайёрлашда уни 0,0233г 100мл колбада
дистилланган сув билан эритилади.
3.
0,03м водород пероксиди эритмаси тайёрлашда уни 0,33мл эритмаси 100мл
дистилланаган сувда тажриба ытказиладиган куни эритилиб, тайёрланади
ва зичлаб беркитиладиган =орамтир шиша идишларда са=ланади.
4.
20% сульфат кислотаси эритмаси-56,6мл концентрланган сульфат
кислотасини (солиштирма массаси - 1,84) эхтиётлик билан 400мл
дистилланган сув устига =уйилади, аралашгандан сынг сув ми=дори 500мл
етказилади.