Фармамакологик биокимё
Download 0.96 Mb. Pdf ko'rish
|
Kitob 9101 uzsmart.uz
- Bu sahifa navigatsiya:
- Машғулот N33. Глутатионредуктаза фаоллигини ани=лаш
- Услуб асоси.
Ишнинг бажарилиши. Пробиркага 1мл ацетат буфери, 1мл индигокармин
эритмаси ва 0,5мл 1:1000 нисбатда суюлтирилган =он эритмаси солинади. +он эритмасини тайёрлаш учун 0,02мл =онни Сали капиллярига олиб, 20мл- ли дистилланган сув устига пуфланади. Ушбу усул билан суюлтирилган = оннинг пероксидаза фаоллиги 6соат давомида са= ланади . Сынгра пробиркани 5минутга 30 0 С ли сув хаммомига жойлаштирилиб, ва=т ытгандан кейин устига 0,5мл 0,3м водород пероксид эритмаси =ышилади ва бир ва=тнинг ызида секундомер босилади . Роса 2 минутдан сынг реакция 3мл 20% сульфат кислота эритмаси =ышилиб, тыхтатилади. Назорат намунасига водород пероксиди ырнига 0,5мл дистилланган сув =ышилиб, ю=оридаги жараён бир хилда =айтарилади. Тажриба ва назорат намуналари 1см кюветаларда 610нм (=изил светофильтр) бир соатдан кечиктирмай, дистилланаган сувга нисбатан колориметрланади. Хисоблаш. +оннинг пероксидазали фаоллигини формула быйича топилади. Е-571,428 мкмол индигокармин мин. мл, бу ерда Е-тажриба ва назорат оптик зичлиги орасидаги фар=и , 571,428-коэффицент. Услуб асосида ани=ланган каламуш =онининг пероксидаза фаоллигини 156 + 9 мкмоль/мин. мл га ты\ри келади. Машғулот N33. Глутатионредуктаза фаоллигини ани=лаш. Глутатионредуктаза (НАДФ . Н 2 -глутатионоксидоредуктаза, КФ 1 . 6 . 4 . 2) = айтарувчи эквивалент сифатида НАДФ . Н 2 ёрдамида оксидланган глутатионни =айтарилиш реакциясини катализлайди. Глутатионредуктаза фаоллигини катта =исми хужайранинг сую= фракциясига жойлашган. Услуб асоси. Глутатионредуктаза оксидланган глутатионни =айтарилиш реакциясини =уйидаги схема быйича катализлайди. ГS-ÃS+ НАДФ . Н 2 =2Г -SH + НАДФ Жихозлар. СФ, гомогенизатор, торзион ва аналитик тарозилари, секундомер, центрифуга, оддий ва центрифуга пробиркалари, хар-щил хажмдаги пипеткалар. Рективлар. 1. 0,05 калий фосфат буфери, рН-7,4 Уни =уйидагича тайёрланади: 6,8г калийдигидрофосфат (КН 2 РО 4 ) тузини 1л дистилланган сувда эритилади (эритма-1)ва 11,41г учмолекула сувли калийгидрофосфат (К 2 НРО 4 . 3Н 2 О) тузини щам 1л дистилланган сувда эритилади (эритма-2) Сынгра 205мл 1- эритмани 480мл 2-эритмага =ышиб, аралаштирилади. Олинган аралашма эритмасини узо= ва= т са= лаш учун унга 372мг хелатон =ышиб музлатгичда са=ланади. 2. Калий фосфат буферида, рН-7,4-оксидланган 1,08м глутатион эритмаси - бунда 1мл эритмада 10мг реактив тутади. 3. Калий фосфат буферидаги, рН-7,4; НАДФ . Н 2 эритмаси; 2мг реактив 1мл да эритилади. Download 0.96 Mb. Do'stlaringiz bilan baham: |
Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling
ma'muriyatiga murojaat qiling