Фармамакологик биокимё

Машғулот N31. Малон диальдегиди ми=дорини ани=лаш.
Услуб асосида. малон диальдегидини (МДА) икки молекула тиобарбитурат
кислотаси (ТБК) билан 100
0
хароратда хосил =илган рангли комплекси
концентрациясини 532-535нм нур ютиши ётади.

---

Жихозлар. Спектрофотометр, сув хаммоми, центрифуга, кимёвий
центрифугали пробиркалар, щар хил хажмдаги пипеткалар, чинни ховонча
дастаги билан
Реактивлар. 1) 0,5% тиобарбитурат кислотали эритмаси. Буни тайёрлаш
учун олдиндан 30мл сув солинган 100мл колбага 500мг ТБК солиниб, 90-100
0
сув хаммомида, чай=
атиб турилган холда , батамом эригунча ушлаб
турилади. Сынгра эритма хажмини сув билан 100мл гача етказилади.
2) 5% метафосфор кислотаси эритмаси-аввалдан фильтрлаб тайёрланган 25%
эритмасидан (музлатгичда 
са=
ланади)тажриба 
ытказиладиган 
куни
суюлтириб, тайёрланади.
Биологик материални тайёрлаш.
0,5г орган ты=имаси (жигар, мия, мушак ва б) сую= азотда музлатилиб,
чинни ховончада майдаланилади, устига 4,5мл метафосфор кислотаси
=ышилиб , аралаштирилгач, минутига 5000айланиш тезлигида 10 минут
давомида центрифугаланади. Чыкма устки =исми яна фильтрланиб,
тажрибага 2мл олинади.
Ишнинг бажарилиши. Олинган 2мл фильтратга (назоратга 2мл метафосфор
кислотаси олинади) 1мл ТБК эритмаси =ышиб, аралаштирилади ва =айнаб
турган сув хаммомига 10минутга =ыйилади. Сынгра о=иб турган сувда
совитилиб, центрифуга пробиркасига солинади ва 6000 айланиш тезлигида
10минут центрифугаланади. Чыкма усти сую=лиги 532нм 1мм кюветада
назоратга нисбатан фотометрланади.
Хисоблаш. МДА ми=дори мкмолда ты=има граммига нисбатан формулада
ани=ланади.
С=
Д
· 5 · 3
бунда
а
Д-оптик зичлик, а-моляр экстинкция коэффиценти, 1,56
.
10
5
тенг, 5-
суюлтириш даражаси, 3-текширилаётган намуна хажми
ТБК эритмасининг са=
ланиш муддати 2хафтадан ошмаслиги керак.
Эритмани таркибидаги =уй=адан =утилиш учун фотометрлаш олдидан
центрифугалаш зарур.