Фармамакологик биокимё

Машғулот N41.
Жигар оксигеназа системаси фаоллигини организмда ани=лаш.
Амидопириннинг (АП) каламуш сийдиги билан ажраладиган бирдан-бир
метаболити 4-аминоантипирин (4-ААП) эканлиги ани=
ланган . Унинг
ми=дори формальдегидни жигар микросомаларидан ажралишига бо\ли=. Шу
сабаб 4-ААП-ни сийдикда ани=лаш асосида моноксигеназа системасини
бутун организмдаги холати ща=ида фикр юритиш мумкин.
Реактивлар.
1.
4-ААП-нинг стандарт эритмаси, 30мг моддани 100мл дистилланган сувда
эритилади (калибрлаш эгри чизи\и тузиладиган куни тайёрланади).
2.
0,02% фенол эритмаси
3.
1% ли =изил =он тузи
[K
3
Fe(CN)
6
] эритмаси.
4.
Аммиакли буфер, рН-10,5, 20г аммоний хлоридни 100мл 25% ли аммиак
эритмасида эритилади.
5.
12,5% учхлорсирка кислотаси эритмаси.
6.
концентрланган хлорид кислотаси (солиштирма о\ирлиги 1,17-1,19)
Ишнинг бажарилиши.
Хайвон =орни ичига 20мг/кг щисобида амидопирин юборилади. Сынгра,
сийдик ми=дорини кыпайтириш ма=садида , 100г тана о\ирлигига 2мл
нисбатида оддий сувни ош=озонга =уйилади ва хайвонни сийдик йи\увчи
=афасга жойлаштириб , 3,6 ,24 соат давомида сийдиги ытказиб йи\илади ва
умумий хажми ылчанади. 4-ААП ани=лаш учун 1,5мл сийдикга 0,3мл
аммиакли буфер =ышилиб, 15 минутдан сынг фильтрланади. 0,6мл тини=
фильтратга 0,5мл 12,5% учхлорсирка кислотаси эритмаси, 2мл 0,02% фенол
эритмаси, 0,1мл 1%ли 
калий 
феррицианид 
эритмаси =ышиб,
аралаштирилади. 10 минутдан кейин 10мм кюветада 510нм назоратга
нисбатан (фенол ырнига 2мл сув =уйилган ва намунани =олган щамма
таркибий =исми са=
ланган щолда ) фотометрланади. Текширилувчи
намунадаги 4-ААП ми=дори (мкг) калибрлаш эгри чизи\и ор=али топилади.
 Калибрлаш эгри чизи\ини тузиш

---

4-ААП нинг стандарт
эритмаси мл
сийдик фильтрати мл аммиакли буфер мл
0
1,5
0,3
0,05
1,45
0,3
0,1
1,4
0,3
0,2
1,3
0,3
0,3
1,2
0,3
0,4
1,1
0,3
Фотометрия кырсаткичлари асосида калибрлаш эгри чизи\и тузилиб,
ю=орида ёзилгани быйича 4ААП ми=дори ани=ланади.
Щисоблаш. 4-ААП ми=дорини 1мл сийдикда ани=лаш учун калибрлаш эгри
чизи\и быйича топилган мкг ни 2га кыпайтирилади. Агарда 4-ААП
ми=дорини сийдикни умумий хажмида ани=лаш лозим былса , топилган
мкг/мл ми=дорини сийдик хажмига (мл) кыпайтирилади.