«Ихтирога патент олиш: Ўзбекистон Республикасида унинг ҳуқуқий муҳофазаси ва ҳимояси» қўлланмасига
Ихтирога патент олиш: Ўзбекистон Республикасида унинг ҳуқуқий муҳофазаси ва ҳимояси
Download 0.83 Mb. Pdf ko'rish
|
ixtiroga patent olish
Ихтирога патент олиш: Ўзбекистон Республикасида унинг ҳуқуқий муҳофазаси ва ҳимояси
67 берилади ва кейин 1-сонли мисолда тавсифланганидек иш тутилади. Қаттиқ кукуннинг чиқиши 0,39 г. Олинган транс-4-ТМАЦ-плазмин ва транс-4-плазминстрептокиназа қо- ришмаси (M.B. 132 300D, макс =272 нм) 2-7 % ацилланмаган ферментларга эга ҳамда изо- тоник сув муҳити (рН 7.4; 20 фоизли глицерин; 37С) да 6 соат давомида актив фермент ва актив мажмуага реактивация қилиниши мумкин. 4-сонли мисол. Цис-4-ТМАЦ-плазмин-стрептокиназа активатор мажмуасини олиш. 2-сонли мисолда тавсифланган усул билан цис-4-ТМАЦ-плазмин-стрептокиназа активар мажмуаси олинади. Ацилациялаш агенти сифатида охирги концентрацияси 0,1 мМ бўлган макс =278 HM, є макс =2,38-10 4 М -1 см -1 ) цис-4-(N,N,N-триметиламино)-долчин кислотасининг 4-нитрофенил эфири эритмасидан фойдаланилади. Ацелациялаш реакцияси 70 минут давомида олиб борилади. Кейинчалик 2-сонли мисолда тавсифланганидек иш тутилади. Қаттиқ кукуннинг чиқиши 0,27 г., мақсадли маҳсулот таркиби 1,2%. Олинган транс-4-ТМАЦ-плазмин-стрептокиназа активатор мажмуи (M.B. 132300D, макс =265 нм) 10-15% ацилланмаган мажмуага эга ҳамда изотоник сув муҳити (рН 7.4; 20 фоизли глицерин; 37С) да 5 соат давомида реактивация қилиниши мумкин. 5-сонли мисол. Транс-4-ТМАЦ-плазминоген-стрептокиназа активатор мажмуасини олиш. Таркибида 0,15 М NaCI бўлган рН 7,0 нинг 0.05 трис-HCI буферида стрептокиназа (57200 I.U./мл) ва плазминоген (10 мкМ) бўлган эритмага охирги концентраияси 0,1 мМ бўлган транс-4-(N,N,N-триметиламино)-долчин кислотасининг 4-нитрофенил эфири эритмаси қўшилади ҳамда 60 минут давомида 4С да инкубация қилинади. Кейин эритма гельфильтрацияга учрайди ҳамда ҳамда оқсил фракциялар 1-сонли мисолда тавсифланганидек лиофилланади. Қаттиқ кукуннинг чиқиши 0,88 г., ацилактиватор таркиби 2,1%. Олинган транс-4-ТМАЦ-плазминоген-стрептокиназа активатор мажмуаси (M.B. 132 300D, макс =272 нм) 5-10% ацилланмаган мажмуага эга ҳамда изотоник сув муҳити (рН 7.4; 20 фоизли глицерин; 37С) сv 2 = 58 мин да актив мажмуага реактивация қилиниши мумкин. 6-сонли мисол. Тўқима туридаги плазминогеннинг транс-4-ТМАЦ-активаторини олиш. Таркибида 1 мг/мл фермент бўлган тўқимали плазминоген активаторининг 1 мл эритмасига таркибида 0,15 М NaCI ва транс-4-(N,N,N-триметиламино)-долчин кислотаси (10 мМ) нинг 0,2 мл миқдоридаги 4-нитрофенил эфири заҳиравий эритмаси қўшилади ҳамда 10 минут давомида 25С да инкубация қилинади. Ферментга 3-4 минут давомида 0,1 мл ациллаш агенти билан такроран ишлов берилгач, эритма сефадекс G-25 да 4 С да гельфильтрация қилинади. Оқсилли фракциялар музлатиб қўйилади ҳамда 40С да сақланади, т ўқима туридаги плазминогеннинг транс-4-ТМАЦ-активатори (M.B. 66 300D, макс =272 нм) изотоник сув муҳити (рН 7.4; 20 фоизли глицерин; 37С) актив ферментга реактивация қилиниши мумкин. 7-сонли мисол. Транс-4-ТМАЦ-урокиназани олиш. 1 мл (25 000 I.U./мл) урокиназа эритмаси (М.В. 54000Д, макс =280 нм, Е 1% 1см =13,6) га рН 8,5 нинг 0.05 М трис-HCI буферида охирги концентрацияси 1 мМ бўлган транс-4- (N,N,N-триметиламино)-долчин кислотасининг 4-нитрофенил эфири эритмаси қўшилади ва 30-40 минут давомида 25С да инкубация қилинади. Ацилациянинг бориш жараёни фермент экстераза активлигининг тушиб кетиши бўйича кузатиб борилади, бунда ацетилглициллизин метил эфирининг 6 мМ эритмаси гидролизининг тезлиги рН-статда аликвоталар таъсири остида ўлчаб турилади. Ҳосил бўлган ацилфермент 6-сонли мисолда тавсифланганидек ажратиб олинади. Олинган транс-4-ТМАЦ-урокиназа (M.B. 543300D; |
Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling
ma'muriyatiga murojaat qiling