КОНСПЕКТ ПОДГОТОВЛЕН СТУДЕНТАМИ, НЕ ПРОХОДИЛ
ПРОФ РЕДАКТУРУ И МОЖЕТ СОДЕРЖАТЬ ОШИБКИ
СЛЕДИТЕ ЗА ОБНОВЛЕНИЯМИ НА VK.COM/TEACHINMSU
ОСНОВЫ ЭНЗИМОЛОГИИ.
АСЕЕВ ВИКТОР ВАСИЛЬЕВИЧ
28
•
Простота выделения
•
Нужное состояние фермента
Необходимо помнить, что выделяемый фермент – белок. Значит, нужно
учитывать
наличие протеаз, чем их меньше, тем нам удобнее, так как все пройдет без разрушений
и разрывов.
Выделение из патогенов.
Требует повышенной осторожности при работе, поскольку есть риск заражения. В
особо рискованных случаях для синтеза используют путь клонирования генов, но и в
таких методах есть риски неверного сворачивания белков и так далее.
КОНСПЕКТ ПОДГОТОВЛЕН СТУДЕНТАМИ, НЕ ПРОХОДИЛ
ПРОФ РЕДАКТУРУ И МОЖЕТ СОДЕРЖАТЬ ОШИБКИ
СЛЕДИТЕ ЗА ОБНОВЛЕНИЯМИ НА VK.COM/TEACHINMSU
ОСНОВЫ ЭНЗИМОЛОГИИ.
АСЕЕВ ВИКТОР ВАСИЛЬЕВИЧ
29
Лекция 7. Методы очистки ферментов.
Перво-наперво фермент требуется извлечь из объекта.
Есть два пути решения задачи:
•
Внеклеточный фермент, и нужно просто удалить клетки, тут трудностей меньше всего
•
Внутриклеточные ферменты. Ферменты находятся в клеточных
жидкостях и тому
подобному.
Необходимо разрушить клетку, но достаточно опционально.
Физические методы
Далее перечислен ряд
физических методов.
Гораздо проще разрушать животные клетки суспензией,
которая разрушает только
оболочки. В таких случаях пользуются методом гидродинамического сдвига.
Метод представляет собой продавливание прессом, вероятно,
самый распространенный
и самый полезный метод разрушения клеток.
Некоторое количество суспензии (объемом 5—40 мл с содержанием клеток до 30 об.
%) помещают в стальной цилиндр с плотно пригнанным поршнем,
имеющим
маленький выпускной клапан с узким отверстием с клапаном соединена выводящая
трубка. Цилиндр с поршнем ставят под 10-тонный гидравлический пресс.
По мере того как поршень опускается,
клетки разрушаются
большими гидродинамическими силами, возникающими при прохождении клеточной
суспензии через отверстие выпускного клапана. У этого метода есть
Do'stlaringiz bilan baham: 
