Конспект подготовлен студентами, не проходил проф. Редактуру и может содержать ошибки. Следите за обновлениями на vk. Com/teachinmsu

Дифференциальная спектроскопия 
Метод, основанный на измерении спектра поглощения против субстрата в системе. 
Получают больший эффект и это позволяет определять различные формы цитохрома, к 
примеру.
Если спектры совпадают, то меняется коэффициент молярной экстинкции. Измена 
спектра и разница отражает переход. В таких случаях оправдано спользование НАД. 

---

КОНСПЕКТ ПОДГОТОВЛЕН СТУДЕНТАМИ, НЕ ПРОХОДИЛ 
ПРОФ РЕДАКТУРУ И МОЖЕТ СОДЕРЖАТЬ ОШИБКИ 
СЛЕДИТЕ ЗА ОБНОВЛЕНИЯМИ НА VK.COM/TEACHINMSU 
ОСНОВЫ ЭНЗИМОЛОГИИ. 
АСЕЕВ ВИКТОР ВАСИЛЬЕВИЧ 
22 
Измеряемые ферменты: 
• 
Искусственные хромогенные субстраты, измена спектра в результате окисления.
Использование сопряженных реакицй. Последовательность продукт-субстрат.
Одно вещество (A) превращается в другое (B), далее вводим фермент (E2), который 
инициирует окисление и появляется еще третье вещество (C). 
Реально мы измеряем скорость только второй реакции и зависит она от концентрации 
изначальных веществ.
Требования: 
• 
Второй фермент в избытке и обязан сразу и быстро превращать вещество в конечный 
продукт.
• 
Первый и второй фермент в разных оптимальных условиях. Создаем оптимум только 
для первого, а для второго создаем избыток. Тогда продукт второго фермента не 
должен влиять на первый и его ингибировать.
• 
Второй фермент осуществил реакцию с небольшой ΔG, и возможна обратная реакция. 
Необходима большая 𝛥𝛥𝛥𝛥. Используют третий фермент. Все работает только в 
стандартных условиях, в нестандартных требуются дополнительные параметры.
Измерение флуоресценцией.
Плюсы: 

---

КОНСПЕКТ ПОДГОТОВЛЕН СТУДЕНТАМИ, НЕ ПРОХОДИЛ 
ПРОФ РЕДАКТУРУ И МОЖЕТ СОДЕРЖАТЬ ОШИБКИ 
СЛЕДИТЕ ЗА ОБНОВЛЕНИЯМИ НА VK.COM/TEACHINMSU 
ОСНОВЫ ЭНЗИМОЛОГИИ. 
АСЕЕВ ВИКТОР ВАСИЛЬЕВИЧ 
23 
• 
Возможность изменять длины волн возбуждения, таким образом возможно отсекать 
побочные компоненты.
• 
Можно отделить субстрат от фермента, правильно подобрав нужные длины волн.
• 
Повышение чувствительности.
Минусы:
• 
Веществ гораздо меньше.
• 
Если нет субстрата, то используют искусственные субстраты.
• 
Есть реакции, в которых меняется оптическая активность.