Конспект подготовлен студентами, не проходил проф. Редактуру и может содержать ошибки. Следите за обновлениями на vk. Com/teachinmsu


Методы определения ферментных белков


Download 1.77 Mb.
Pdf ko'rish
bet15/42
Sana20.06.2023
Hajmi1.77 Mb.
#1633785
TuriКонспект
1   ...   11   12   13   14   15   16   17   18   ...   42
Bog'liq
enzymology-M

Методы определения ферментных белков 
Различают две группы методов определения:
• 
Неразрушающего контроля. Определение происходит, не нарушая хода реакции 
• 
Методы физические (чаще под этим подразумевают оптические методы). Беспрерывная 
регистрация, сохраняется возможность менять условия.  


КОНСПЕКТ ПОДГОТОВЛЕН СТУДЕНТАМИ, НЕ ПРОХОДИЛ 
ПРОФ РЕДАКТУРУ И МОЖЕТ СОДЕРЖАТЬ ОШИБКИ 
СЛЕДИТЕ ЗА ОБНОВЛЕНИЯМИ НА VK.COM/TEACHINMSU 
ОСНОВЫ ЭНЗИМОЛОГИИ. 
АСЕЕВ ВИКТОР ВАСИЛЬЕВИЧ 
20 
• 
Метод отбора проб. Создается реакционная среда определенного объема, от которого 
отбираются аликвоты, в которых останавливается реакция и производятся измерения. 
Больше аналитический способ. Плюсы: возможность подбирать чувствительность. 
Небольшое время отбора.  
• 
Метод цветных реакций.  
• 
Осаждение полимеров. В этом методе важно точно выявить линейный участок в методе 
отбора проб. 
Факторы, останавливающие реакцию:
• 
Физические. Нагревание 
• 
Химические. Кислота/щелочь 
 
 


КОНСПЕКТ ПОДГОТОВЛЕН СТУДЕНТАМИ, НЕ ПРОХОДИЛ 
ПРОФ РЕДАКТУРУ И МОЖЕТ СОДЕРЖАТЬ ОШИБКИ 
СЛЕДИТЕ ЗА ОБНОВЛЕНИЯМИ НА VK.COM/TEACHINMSU 
ОСНОВЫ ЭНЗИМОЛОГИИ. 
АСЕЕВ ВИКТОР ВАСИЛЬЕВИЧ 
21 
Лекция 5. Методы непрерывного измерения активности ферментов. 
Метод измерения поглощения: спектрофотометрия. Подбор длины волны для 
наибольшего поглощения. Основная задача: выяснить коэффициент молярной 
экстинкции, далее, проводя замеры, получить кривую.
В энзимологии и не только гораздо проще работать с окрашенными веществами, 
однако в природе редко встречается натуральная окраска. 
В реальной жизни не всегда бывает так, что продукт и субстрат имеют разные 
поглощения в ультрафиолетовой области, поэтому для дальнейших замеров 
используют различные длины волн.
Пример графика зависимости коэффициента спектра поглощения субстрата от 
длины волны 
Рисунок 8. График зависимости коэффициента спектра поглощения (ось ординат) от 
длины волны (ось абсцисс) 
Измеряют разницу между парой графиков, поэтому меряют не всегда в максимуме.

Download 1.77 Mb.

Do'stlaringiz bilan baham:
1   ...   11   12   13   14   15   16   17   18   ...   42




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling