КОНСПЕКТ ПОДГОТОВЛЕН СТУДЕНТАМИ, НЕ ПРОХОДИЛ
ПРОФ РЕДАКТУРУ И МОЖЕТ СОДЕРЖАТЬ ОШИБКИ
СЛЕДИТЕ ЗА ОБНОВЛЕНИЯМИ НА VK.COM/TEACHINMSU
ОСНОВЫ ЭНЗИМОЛОГИИ.
АСЕЕВ ВИКТОР ВАСИЛЬЕВИЧ
38
Рисунок 15. Пример катионного обмена
Условия разделения.
Условия активности ферментов необходимо соблюдать. Очень важен выбор буферной
системы должен учитывать природу обменников,
катион-анион, анион-катион.
Две формы проведения:
•
Хроматография в объеме
•
Колоночная,
иногда гибрид
В емкость помещают разделяемые белки, размешивают с раствором носителя, достигая
полного связывания. Далее проводят центрифугирование,
и затем так повторяют до
предельной чистоты.
Хроматография –
непрерывный процесс перераспределения.
Процесс элюции.
Для разделения близким по своим хроматографическим свойствам веществ используют
изократическую элюцию – раствором неизменного состава. Это вариант элюции дает
наилучшее разрешение пиков.
Элюцию ступенчатым или непрерывным градиентом осуществляют чаще всего за счет
изменения концентрации соли в буфере неизменного состава.
КОНСПЕКТ ПОДГОТОВЛЕН СТУДЕНТАМИ, НЕ ПРОХОДИЛ
ПРОФ РЕДАКТУРУ И МОЖЕТ СОДЕРЖАТЬ ОШИБКИ
СЛЕДИТЕ ЗА ОБНОВЛЕНИЯМИ НА VK.COM/TEACHINMSU
ОСНОВЫ ЭНЗИМОЛОГИИ.
АСЕЕВ ВИКТОР ВАСИЛЬЕВИЧ
39
Изменение рН буфера используют, как правило, для ступенчатого
градиента с целью
нейтрализации, а иногда и изменения знака заряда компонентов фракционируемой
смеси или нейтрализации самого обменника.
Условия посадки препарата на колонку при градиентной элюции обычно бывают
таковы, что он концентрируется в верхней части колонки.
Do'stlaringiz bilan baham: